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转人DPP4的转基因小鼠模型的构建与鉴定

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目的：制备携带有人源DPP4基因(hDPP4)的转基因小鼠,为中东呼吸综合征(Middle East Respiratory Syndrome.MERS)冠状病毒疫苗的研制和治病机制分析工作提供小动物模型. 方法：首先从体外培养的人类细胞系中克隆HDPP4cDNA序列,将其插入表达载体后构建重组质粒.随后利用原核注射法制备HDPP4转基因小鼠,繁育出F0代转基因小鼠.选取整合有HDPP4基因的F0代鼠与野生型鼠杂交繁殖获得F1代小鼠.PCR鉴定F1代转基因小鼠基因型,同时用RT-PCR和Western blotting方法检测HDPP4在转基因小鼠全身组织表达情况. 结果：共得到F0鼠4只.F1代转基因小鼠经Westernblotting和RT-PCR检测,HDPP4表达水平在心、肝、脾、肺、脑等组织中表达中均明显增高. 结论：成功构建HDPP4基因小鼠,并且能够稳定遗传.为后续的MERS疫苗评价相关工作奠定了基础.

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来源
《第十三届中国实验动物科学年会》|2017年|1-6|共6页
会议地点成都
作者
Liu Chao; 刘超; Cui Ying; 崔莹; Li Bing; 李冰; Xie Ying; 谢英;
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作者单位

中国实验动物学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类呼吸系及胸部疾病;
关键词
中东呼吸综合征; 致病机理; 冠状病毒疫苗; 动物模型;

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