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蛋白吸附力调控细胞牵拉力的传递和干细胞命运

摘要

蛋白吸附是生物材料植入体内后在其表面发生的首要事件,蛋白层是细胞与材料发生相互作用的桥梁.当细胞通过蛋白质层粘附到材料表面时,细胞自身会产生牵引力(CTF),并通过蛋白层、蛋白-材料界面向材料传递.细胞通过CTF的产生和传递来感知和度量基底材料的力学性质,如基底刚度、应力松弛等.因此,认为蛋白和材料之间的界面力,即蛋白吸附力(Fad)是调控CTF传递的重要因素,并影响细胞行为,包括干细胞命运.然而,迄今却鲜有研究关注Fad及其对细胞行为的调控作用.以大鼠骨髓间充质干细胞(rMSC)为模型细胞,采用免疫荧光和Western Blotting技术检测了rMSC在不同PDMS表面接种2h和12h的斑点粘附(focal adhesion)形成情况以表征CTF大小。为检测Fad对CTF传递的影响,分别采用免疫荧光染色技术和光学显微镜观察了吸附FN在PDMS表面的组装情况和PDMS基底的变形情况。为进一步了解Fad对rMSC分化的影响,检测了rMSC在各基底表面培养14天后的成脂分化(PPARγ和油红O染色)和成骨分化(Runx2和ALP表达)情况。

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