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利用噬菌体随机肽库筛选赭曲霉毒素A模拟表位

摘要

目的:从噬菌体随机七肽库中筛选得到赭曲霉毒素A的模拟表位.方法:以纯化的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体(OTA mAb)为配基,亲和筛选融合表达在丝状M13噬菌体次要衣壳蛋白(PⅢ)上的随机七肽库,通过Phage-ELISA和间接竞争ELISA方法鉴定阳性噬菌体克隆.结果:经过四轮亲和筛选,共得到22株与OTA mAb特异结合的阳性噬菌体克隆,且该结合都能够被OTA标品阻断,DNA测序及多肽核心序列分析后,得到赭曲霉毒素A的模拟表位的主要序列为:MPLWXDL(X为任意氨基酸).结论:间接竞争ELISA线性范围为250~8000pg/mL,表明含有赭曲霉毒素A模拟表位的噬菌体可以替代OTA标品建立无毒快速检测方法.

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