牛前体脂肪细胞的分离培养及诱导分化

摘要

建立牛前体脂肪细胞的体外分离培养方法,研究牛前体脂肪细胞的生物学特性和分化特征.采用Ⅰ型胶原酶消化法自新生牛脂肪组织中获得前体脂肪细胞,对培养的前体脂肪细胞进行形态学观察、生长曲线测定、油红O染色及脂肪细胞标志基因LPL、PPAR-r和脂联素等的表达研究.80%的牛前体脂肪细胞接种后12h开始贴壁,4d后开始向脂肪细胞转化,10d后绝大部分细胞脂滴融合,细胞脂肪含量增加;分离的前体脂肪细胞接种后1~2d生长缓慢,3~8d进入对数生长期,9d后进入平台期,接着细胞数目开始下降.经胰岛素诱导分化过程中,LPL在分化的早期开始表达,PPAR-γ在分化的中期开始高度表达,而脂联素在前体脂肪细胞分化的前期未检测到,在细胞分化后期高度表达.用Ⅰ型胶原酶消化法可获得大量的牛前体脂肪细胞.培养的牛前体脂肪细胞成分均一,生长旺盛,经胰岛素诱导后能稳定的向脂肪细胞分化。

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