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苹果ACLSV CP基因酵母双杂交诱饵载体构建及自激活鉴定

摘要

构建了用于苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorot(i)c leaf spot virus,ACLSV)外壳蛋白(coat protein,CP)酵母双杂交试验的诱饵载体,并进行了自激活及毒性验证.以含有ACLSV CP特异性序列的重组质粒为模板,经PCR扩增获得合有NdeⅠ/PstⅠ双酶切位点的CP特异性序列,连接到pMD18-T simple载体,测序鉴定正确后,NdeⅠ/PstⅠ双酶切获得的CP目的基因与同样双酶切的酵母质粒载体pGBKT7连接,转化酵母菌株Y2H gold,并进行自激活与毒性试验.结果表明重组质粒pGBKT7-CP序列正确,转化酵母菌株无自激活、无毒性.

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