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间充质干细胞条件培养基对新生大鼠缺氧缺血脑损伤移植神经干细胞凋亡的影响

摘要

目的:研究来源于人脂肪组织培养的间充质干细胞条件培养基对新生大鼠缺氧缺血脑损伤移植神经干细胞凋亡的影响。方法:新生SD大鼠海马神经干细胞培养至第2-3代,DAPI标记后用于移植。7日龄SD大鼠根据Rice法进行改进,制作缺氧缺血脑损伤模型。模型分为三组:模型组(Ⅰ)、因子联合细胞移植组(Ⅱ)及移植组(Ⅲ)。建模后24小时,Ⅱ行右侧颈总静脉注射50ul脂肪间充质干细胞条件培养基;Ⅲ注射等体积50ul生理盐水。静脉注射止血后,Ⅱ、Ⅲ于左侧海马进行神经干细胞移植;Ⅰ为空白对照组,不采取任何注射和移植。分别于移植后24、48小时,三组脑组织冰冻切片行TUNEL染色观察细胞凋亡情况;提取左侧损伤侧脑组织蛋白质,测定裂解的caspase-3凋亡蛋白的表达。结果:Ⅱ、Ⅲ脑组48小时差异有统织外源性神经干细胞凋亡数,于移植后24小时差异无统计学意义;移植后计学意义。三组左侧损伤侧脑组织蛋白质裂解的caspase-3凋亡蛋白表达,于移植后24小时差异无统计学移植;移植后48小时差异有统计学意义。结论:间充质干细胞条件培养基可以改善新生大鼠缺氧缺血脑损伤模型移植的神经干细胞存活,降低其凋亡;降低裂解的caspase-3凋亡蛋白的表达。

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