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狂犬病Nested-PCR检测技术的研究应用及RFLP分析

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设计两对引物M1/M2、N1/N2建立起Nested-PCR,该方法能检测出含0.3LD50狂犬病病毒,比普通PCR的敏感性提高了10000倍,通过27份阳性的病料的序列分析,所检测出的全部都是狂犬病病毒,具有很强的特异性.遗传进化树表明,广西狂犬病毒株可分成4个群,即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ群,Ⅳ群与ERA株核苷酸的同源性在99.1-99.6﹪之间.利用XspI和AccⅢ酶切,Ⅰ群狂犬病野毒株得到70bp、130bp、260bp3个片段,而Ⅱ、Ⅲ群狂犬病野毒株得到130bp、330bp2个片段,Ⅳ群和ERA株出现130bp、200bp2个片段.用SspⅠ酶切,Ⅱ群的毒株切成180bp和280bp两个片段,而其它3个群的毒株没有SspⅠ酶切位点.本研究中的Nested-PCR与RFLP技术,具有快速、敏感、特异的特点,广泛应用于实验室狂犬病的诊断及流行病学调查研究.

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来源
《中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会》|2005年|1057-1059|共3页
会议地点四川雅安
作者
熊毅; 刘棋; 朱伟; 郭建刚; 李华明; 刘科;
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作者单位

中国畜牧兽医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类病毒病;
关键词
狂犬病; 狂犬病病毒; Nested-PCR检测; RFLP分析; 实验室诊断; 流行病学;

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