鸭Ⅰ型疱疹病毒TK基因的发现及其分子特性

摘要

通过对本实验室构建的鸭Ⅰ型疱疹病毒(duck herpesvirus type-1)DNA基因文库的重组质粒DNA序列测定,得到一段1077bp的完整ORF,经过生物信息学分析属于胸苷激酶(TK)基因。设计引物对该基因进行PCR扩增并克隆到pMD-18-T载体上,转化宿主菌DH5α,提取阳性重组质粒进行PCR、酶切鉴定并测序证明本研究获得了DPV TK基因。利用生物信息学软件GENSCAN、ProtScale、SignalP2.0、Scansite、TMpred、PROSITE、在线Predictprotein等对该基因分析表明DPVTK基因具有疱疹病毒的典型特征,含有ATP结合结构域和核苷酸结合结构域两个功能结构域,且该基因具有与功能相关的磷酸化位点和氨酰化位点,编码的多肽链中亲水区占据区域大于疏水区域,是一种膜外蛋白。利用DNAstar软件分析DPV TK基因与其他疱疹病毒TK基因序列同源性并绘制系统进化树发现DPVTK基因与禽类疱疹病毒(α-疱疹病毒)的进化关系最近。

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