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运用α-氰代酯荧光底物检测抗性棉蚜羧酸酯酶代谢活性

摘要

羧酸酯酶能水解众多药物和农药并具有广泛的底物选择性,需要有适合的底物去衡量其水解谱。为了发展新的酯酶底物,一种含有α-氰基的酯类作为荧光酯酶报告底物被用来衡量酯酶的水解活性,这种底物具有水解后生成具有荧光化合物的特性。本文运用这种策略合成了溴氰菊酯和高效氯氰菊酯报告荧光底物并测定了不同品系棉蚜羧酸酯酶代谢活性。结果表明:氧化乐果棉蚜抗性和敏感品系棉蚜羧酸酯酶对溴氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为10.0和3.4pmol.min-1.mg-1:对高效氯氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为4.0和2.4 pmol.min-1.mg1,抗性品系羧酸酯酶对溴氰菊酯和高效氯氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为敏感品系的2.94和1.67倍;溴氰菊酯棉蚜抗性和敏感品系羧酸酯酶对溴氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为7.6和6.2pmol.min-1.mg1;对高效氯氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为9.3和5.2pmol.min-1.mg-1,抗性品系羧酸酯酶对溴氰菊酯和高效氯氰菊酯报告荧光底物的代谢活性分别为敏感品系的1.23和1.79倍。这种衍生的报告荧光底物能够衡量昆虫羧酸酯酶的水解活性,从而从代谢水平来监测昆虫对有机磷和菊酯类农药的抗性水平。

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