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猪白细胞介素2/6嵌合基因的融合表达及活性研究

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为研究高效猪基因工程免疫增强剂，本研究采用SOE-PCR方法通过一基因柔性接头(linker)将猪白介素2 (PoIL-2)、6(PoIL-6)基因构建成PoIL-2-linker-POIL-6嵌合基因并克隆入pQE-30原核表达载体中进行融合表达；通过专利蛋白纯化复性方法对表达的重组融合蛋白(rPoIL-2-linker-POIL-6)进行纯化。分别采用MTS法检测rPOIL-2-Iinker-POIL-6促猪外周血T淋巴细胞和猪脾脏淋巴细胞的增殖活性；分别采用POIL-2和PoIL-6 ELISA 试验方法检测rPoIL-2-linke-POIL-6蛋白特异性免疫反应的活性。结果：成功构建了POIL-2-linker-PoIL-6嵌合基因。原核表达的rPoIL-2-Iinker-PoIL-6蛋白分子量大小约28 ku，蛋白纯化后纯度在96%以上。rPoIL-2-linker-PoIL-6蛋白分别与单rPoIL-2、rPoIL-6对照具有相近的生物学活性，可显著促进猪外周血淋巴细胞和猪脾脏细胞的增殖，并可与抗PoIL-2、PoIL-6单抗发生特异性免疫反应。研究结果初步证明了rPoIL-2-linker-POIL-6在体外具有单rPOIL-2和rPOIL-6蛋白的双重生物学活性，为下一步进行动物体内活性研究奠定了基础。

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来源
《中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会》|2010年|1224-1228|共5页
会议地点长春
作者
闫若潜; 马文涛; 吴志明; 张志凌; 张健; 张盼盼;
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作者单位

中国畜牧兽医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类猪;家畜免疫学;
关键词
猪白介素2; 猪白介素6; 嵌合基因; 融合表达;

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