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基于调控肺泡上皮细胞介导炎症反应的补肺益肾方“谱-效”相关性研究

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目的：对调控肺泡上皮细胞介导炎症反应的补肺益肾方"谱-效"相关性进行研究。方法：对补肺益肾方中人参、枸杞子等药材用水提醇沉法提取，采用L9(34)正交设计实验，以人参皂营Rbt、Re、Rbt的总含量为指标，考察加水量、煎煮时间、煎煮次数及醇沉浓度对提取工艺的影响;对补肺益肾方进行拆方，通过筛选高效液相色谱条件，根据化学指纹图谱研究的要求，运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，建立补肺益肾方及其拆方的HPLC指纹图谱；分别以CSE和LPS刺激A549细胞，MTT法筛选出最佳的刺激浓度后，A549细胞按孔平均分为正常组(20%正常大鼠血清)、刺激组(20%正常大鼠血清+75pg/mL LPS或5% CSE)、用药组(20%补肺兼肾各拆方组大鼠血清+75pg/mL LPS或5% CSE)安排实验。结果：人参等药材采用水煎煮提取，加12倍量水，煎煮2次，每次60min浓缩液加95%乙醇至含醇量为70%，静置12h，取上清液回收乙醇浓缩，为最佳提取工艺；十批样品指纹图谱间的相似度均达到0.90以上，全方确定了71个共有峰；与正常组比较，A549细胞CSE组MMP-9浓度升高，IL-3、IL-8和TGF-p浓度降低;LPS组TIMP-1浓度升高，IL-3、TGF-p浓度降低。结果：正交试验优选出的补肺益肾方提取工艺稳定、高效、简便易行，为后期新药研发的制剂工艺奠定了基础；HPLC法建立了补肺益肾方及其拆方的指纹图谱，并对其进行评价分析，10批次样品间指纹图谱的相似度均大于0.90，全方共确定了71个共有峰，均找出了药材来源；CSE和LPS刺激对肺泡上皮细胞A549分泌细胞因子均有一定程度的影响，补肺益肾含药血清对CSE和LPS刺激下细胞因子分泌量的改变有一定的调节作用；谱-效相关性研究提示，补肺益肾方中人参、黄茂、浮羊蕾、陈皮、赤芍等药材中主要成分对矫正A549细胞炎症因子的浓度变化有显著的相关性。

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来源
《中华中医药学会第十七次全国中医肺系病学术交流会》|2013年|525-526|共2页
会议地点烟台
作者
冯素香; 李娟; 陈玉龙; 李建生; 赵迪; 周悌强;
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作者单位

中华中医药学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类中药临床药理;
关键词
慢性阻塞性肺疾病; 肺泡上皮细胞; 炎症反应; 补肺益肾方;

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