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苏云金芽胞杆菌中新型vip3基因的克隆与活性分析

摘要

本研究使用了高分辨熔点系统(HRMA)对vip3基因进行分型,根据所有已报道的vip3类基因的保守区设计一对扩增片段为150 bp的通用鉴定引物,利用高分辨熔点系统对产物的熔解曲线进行分析,由于扩增产物的碱基组成不同,不同类型的基因产生不同的熔解曲线,从而对样品进行基因分类.通过该方法发现本实验室保存的72株标准菌株中共有23株含有vip3类基因。生物测定结果显示,Vip3Aa11对小菜蛾和小地老虎活性较低;而Vip3Aa39对小地老虎具有很高的杀虫活性,LC50为3.69μg/ml,对小菜蛾活性较低,LC50大于150μg/ml。上述结果表明,Vip3蛋白少数氨基酸的变化对其杀虫活性影响很大。vip3Af,vip3Ag以及vip3 Ba同样进行了IPTG诱导表达及生物活性的测定,对小菜蛾和小地老虎活性等试虫均无活性。

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