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杜鹃红山茶CaCPI基因的克隆及过量表达提高烟草植株的抗虫性

摘要

根据山茶(Camellia japonica Linn.)同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3',5'-RACE技术,从杜鹃红山茶(C.azalea)嫩叶组织中克隆出半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cysteine proteinase inhibitor, CPI),命名为CaCPI,基因全长579bp,开放阅读框306bp,编码101个氨基酸,分子量为11.078KDa,等电点pI=6.72.利用荧光定量Real-time RT-PCR方法对杜鹃红山茶根、茎、叶中该基因的表达特性进行分析,结果表明,CaCPI基因在叶中的表达量较高,其次为茎,在根中表达量较低,比较显示叶的表达量分别约为茎的1.53倍,根的1.61倍.转基因烟草分析表明,过量表达CaCPI后,转基因烟草中目的基因表达量提高了55.84~174.83倍,并且转基因植株抗蚜虫能力获得提高(引用数据).

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