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检测鸭坦布苏病毒NS1蛋白抗体ELISA方法的建立

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为了检测鸭群中鸭坦布苏病毒的血清学流行情况,本研究在前期成功表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的基础上,建立了检测鸭血清中鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法.棋盘法确定了当纯化的NS1蛋白包被量为0.188μg/孔,待检血清1∶200稀释,HRP标记的兔抗鸭二抗1∶16000倍稀释时反应条件最佳.在最佳反应条件下,阴阳性临界值判定标准为0.467.用建立的间接ELISA方法对番鸭细小病毒、鹅细小病毒、鸭肝炎病毒、鸭疫里默氏杆菌阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.批内和批间重复试验的最大变异系数分别为6％和10％,显示该方法具有很好的稳定性.用建立的ELISA方法检测临床鸭坦布苏病毒感染鸭及攻毒蛋鸭的55份临床血清样品,测得52份为阳性,阳性率为94.5％,对36份阴性鸭群血清样品进行检测,36份为阴性,阴性率为100％.该方法为鸭坦布苏病毒的诊断和流行病学监测奠定了基础.

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来源
《第25届广东省科技进步活动月——畜牧兽医学术与科技创新发展大会》|2016年|191-195|共5页
会议地点广州
作者
Sun Minhua; 孙敏华; 郭建伟; Guo Jianwei; Li Linlin; 李林林; Dong Jiawen; 董嘉文; Kuang Ruihuan; 邝瑞欢; Wu Xuanguang; 吴玄光; Zhang Jianfeng; 张建峰; 胡奇林; Hu Qilin; Zhang Chunhong; 张春红;
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作者单位

广东省畜牧兽医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 S858.32:S855.3;
关键词
鸭坦布苏病毒; NS1蛋白; 抗体检测; 酶联免疫吸附测定;

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1. 检测鸭坦布苏病毒NS1抗体ELISA方法的建立 [J] . 孙敏华 ,郭建伟 ,李林林 . 广东畜牧兽医科技 . 2017,第001期
2. 检测坦布苏病毒病抗体 NS1-ELISA方法的建立与初步应用 [J] . 谢星星 ,李祥瑞 ,李银 . 浙江农业学报 . 2014,第001期
3. 鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立和应用 [J] . 余斌 ,华炯钢 ,刘跃生 . 浙江畜牧兽医 . 2014,第005期
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5. 鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立 [J] . 姬希文 ,闫丽萍 ,颜丕熙 . 中国预防兽医学报 . 2011,第008期
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