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转E0基因黄芪及其免疫原性研究

摘要

为研制鹿源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)转基因黄芪疫苗,首先,以BVDV RNA为模板,通过RT-PCR扩增其E0基因,将E0基因和pBI121植物表达载体进行连接和克隆. 其次,通过花粉管通道法,将pBI121-E0转化黄芪,通过PCR、RT-PCR法、Western-blotting和ELISA法,对转基因黄芪进行鉴定.最后,将BVDV转基因E0黄芪再生苗蛋白免疫1月龄健康仔鹿,间接ELISA和淋巴细胞转化实验检测其免疫应答水平.结果表明:成功构建了BVDV E0基因植物表达载体pBI121-E0,BVDV基因E0已整合到黄芪基因组中,转基因黄芪疫苗产生了显著的体液免疫和细胞免疫应答.

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