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基于抗原抗体反应的牛源A型多杀性巴氏杆菌保护性抗原的筛选鉴定

摘要

为筛选牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌新型保护性抗原,本研究应用生物信息学方法筛选出56个保护性抗原候选基因,以牛源A型PmCQ2株基因组为模板,经克隆表达,分别获得与预期相符的56个重组目的蛋白,将其与本实验室前期克隆表达的36个推定蛋白(共计92个)纯化后分别包被酶标板,采用A型、B型、F型人工感染血清及A型灭活苗免疫血清,经间接ELISA来筛选具有良好反应原性的蛋白.最终筛选出A型特异蛋白2个;能与A型、B型和F型血清反应的共有蛋白20个;只与A型人工感染血清反应,而不其他血清反应的差异蛋白13个.挑选其中4种蛋白,即A型、B型和F型共有蛋白2个(1号、L17)及A型差异蛋白2个(11号、L16号)分别皮下免疫小鼠后,检测其对A型、B型和F型巴氏杆菌的攻毒保护效果.结果表明,4种蛋白对PmCQ2株攻毒保护效果都很高,可达50%以上;1号、11号、L17号蛋白对B型均有较高的保护性,但对F型巴氏杆菌无保护性;L16号蛋白对B型、F型均无免疫保护性.

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