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金属元素标记结合质谱蛋白质绝对定量新方法研究及其对腾冲嗜热厌氧菌中烯醇酶含量分析

摘要

定量蛋白质组研究方法主要包括以生物质谱检测为核心的代谢标记、酶促氧-18标记和化学标记技术,本文以化学性质相近且价格低廉的镧系金属元素铥和鋱鳌合双功能试剂四氮杂环十二烷四乙酸类((1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7-trisacetic acid DOTA-NHSester)制备非同位素标记肽段作为内标物,并创新性地结合多反应监测质谱技术,建立了一种复杂生物样本中蛋白质绝对定量新方法,并将其用于腾冲嗜热厌氧菌中烯醇酶含量的分析,测定的平均浓度为8.927ng/μg,且两个被测肽段的四个离子对测定结果的相对标准偏差为7.94%,准确度也小于15%,均满足复杂生物样本中微量蛋白质含量定量分析的要求。结果表明该定量方法可用于生物样品中蛋白质的绝对定量分析。

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