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大黄鱼Lc-UBE2D4基因的克隆及其表达分析

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泛素缀合酶E2是蛋白质泛素化系统中的关键酶,对降解的靶蛋白的特异性选择起决定性作用,参与了细胞内80％以上的蛋白降解,对于细胞周期调控、细胞凋亡、基因转录及表达等生理活动具有重要的调控作用.本研究从已构建的大黄鱼(Larimichthys crocea)性腺线性化cDNA文库中筛选出泛素缀合酶(ubiquitin-conjugating enzymes E2D4,Lc-UBE2D4)同源基因片段,利用SMART-RACE方法克隆出其全长cDNA序列,并利用荧光定量PCR技术检测其在大黄鱼不同组织和性腺不同发育阶段的差异表达情况.结果显示:Lc-UBE2D4基因全长798bp,其中ORF为441bp,可编码147个氨基酸,含有一段典型的泛素缀合酶UBC结构域及其半胱氨酸激活位点.定量PCR结果分析发现,Lc-UBE2D4在脾脏和性腺中表达量较高,在脾脏和精巢的表达水平极显著高于其他各组织(P＜0.01),同时在卵巢中的表达亦显著高于除脾脏和精巢外的其他各组织(P＜0.05);通过对Lc-UBE2D4基因在性腺不同发育阶段表达模式的研究发现,该基因在精巢3个时期中的表达水平显著高于各发育阶段的卵巢(P＜0.05),推测Lc-UBE2D4基因在大黄鱼性腺发育过程中起着重要的调节作用,脾脏中的高表达也暗示其可能参与免疫机能.

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来源
《第五届中国大黄鱼产业发展论坛》|2018年|80-91|共12页
会议地点浙江台州
作者
Han Kunhuang; 韩坤煌; Zhou Peng; 周鹏; Zou Zhihua; 邹志华; Zhang Ziping; 张子平; Wang Yilei; 王艺磊;
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作者单位

中国渔业协会国家大黄鱼产业科技创新联盟;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类大黄鱼;
关键词
大黄鱼; 性腺发育; 免疫机能; 泛素缀合酶; 基因调控;

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