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首页> 中文会议>第八届上海国际针灸临床与科研学术研讨会 >艾灸对克罗恩病大鼠TNF-α/TNFR1诱导的结肠上皮细胞凋亡的影响

艾灸对克罗恩病大鼠TNF-α/TNFR1诱导的结肠上皮细胞凋亡的影响

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摘要

目的:观察艾灸(温和灸和隔药灸)天枢和气海穴对克罗恩病大鼠结肠上皮屏障的修复作用及其保护机制.方法:分别进行体内和体外两方面的研究,在体实验采用国际公认的Morris方法制备克罗恩病大鼠模型.随机分为正常组、模型组、隔药灸组、温和灸组、西药组.隔药组、温和灸组均选取天枢(双侧)、气海穴进行隔药灸和温和灸治疗10天,每日1次,西药组采用SASP灌胃治疗10天,每日2次.模型组和正常组不做治疗,只做相同的固定.采用ELISA、流式细胞术等技术与方法,①观察艾灸调节克罗恩病大鼠结肠黏膜TNF-α、TNFR1、TNFR2和结肠上皮细胞凋亡情况.同时进行体外实验,将正常组大鼠结肠上皮细胞纯化并培养构建体外结肠上皮细胞屏障,再分别与模型组、隔药灸组、温和灸组、西药组四组大鼠结肠黏膜上清液混合培养,②观察艾灸调节体外培养的正常大鼠结肠上皮细胞诱导凋亡情况.并分别对体内和体外培养的结肠上皮细胞凋亡与TNF-α、TNFR1、TNFR2的相关性进行分析,③观察TNF-α和TNFR(TNFR1和/或TNFR2)诱导结肠上皮细胞凋亡的情况.结果:①模型组大鼠结肠粘膜TNF-α、TNFR1和TNFR2含量及结肠上皮细胞凋亡率均显著增高,较正常组均有显著性差异(P均＜0.01).与模型组比较,隔药灸、温和灸和西药组均可明显降低克罗恩病大鼠结肠粘膜TNF-α、TNFR1含量以及结肠上皮细胞凋亡率(P均＜0.01),且隔药灸组、温和灸组优于西药组(P＜0.05),而TNFR2含量则无明显差异(P均＞0.05);相关性分析显示,结肠上皮细胞凋亡率与TNF-α、TNFR1水平呈正相关(分别为r=0.591,r=0.554,P均＜0.01),与TNFR2水平不相关(r=0.035,P=0.832).②与模型组相比,隔药灸、温和灸和西药组上清液诱导正常大鼠结肠上皮细胞凋亡率均有明显降低(P均＜0.01),且隔药灸、温和灸组优于西药组(P＜0.05);相关性分析显示,各组诱导凋亡率与TNF-α、TNFR1水平呈正相关(r=0.652,r=0.675,P＜0.01),与TNFR2水平不相关(r=0.103,P=0.529),体内和体外培养结果一致.提示两艾灸组均可明显降低克罗恩病大鼠结肠黏膜TNF-α、TNFR1含量以及结肠上皮细胞凋亡.结论:艾灸(隔药灸和温和灸)可能是通过抑制克罗恩病大鼠结肠黏膜TNF-α和TNFR1异常表达,进而通过TNF-α/TNFR1途径减少结肠上皮细胞凋亡,从而达到修复/保护克罗恩病大鼠结肠上皮屏障损伤之目的.

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