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金黄色葡萄球菌肠毒素C3单克隆抗体的制备与鉴定

摘要

目的:制备稳定分泌抗金黄色葡萄球菌肠毒素C3(SEC3)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并对单克隆抗体的性质进行鉴定.方法:以SEC3重组蛋白免疫Balb/c小鼠,应用细胞融合技术将小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA法检测筛选及2次有限稀释法克隆化培养,获得目的杂交瘤细胞株,并对其所产生的单克隆抗体进行效价、亲和常数及抗原识别表位等相关性质的鉴定.结果:最终获得了两株能分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞1C12和2A2,二者细胞培养上清的效价分别为1(∶)3200和1(∶)1600.经分析可知1C12细胞株的亲和力高于2A2细胞株,同时相加实验表明两个单克隆抗体识别抗原表位相同.结论:单克隆抗体制备成功,为进一步完善肠毒素SEC3的临床检测奠定了基础.

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