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多种乙型肝炎病毒突变株可调控性表达细胞系的构建

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目的：构建多种HBV突变株可调控性表达细胞系,并检测它们对常用的核苷类似物的敏感性。方法：在表达野生型HBV的pTRE-HBVT质粒上,应用PCR方法实现定点突变,分别构建多个HBV突变体质粒,包括:2个HBsAg阴性细胞株(疫苗逃逸);6个常见的核苷类似物耐药突变株;质粒转染我们前期构建的HepG2TA2-7细胞系(整合有PtTA 2质粒)，潮霉素筛选获得抗性细胞克隆。结果：所有的细胞株对阿德福韦酷敏感，已报道的阿德福韦耐药突变株N236T. A181T和N236T+A181T对阿德福韦的敏感性下降不明显，通过提取细胞培养上清液中HBV DNA, PCR扩增含突变点的片段，测序证实与实验设计完全相符合。结论：本研究成功地构建了8个HBV突变株可调控性表达细胞系，有望作为细胞模型用于HBV分子生物学研究及抗HBV药物筛选。

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来源
《第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议》|2012年|222-223|共2页
会议地点重庆
作者
关卫卫; 孙殿兴;
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作者单位

中华医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 R512.620.2;
关键词
乙型肝炎病毒; 突变株; 表达调控; 耐药基因;

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