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迟钝爱德华菌PuAH基因的原核表达及其部分特性分析

摘要

试验旨在对迟钝爱德华菌EIB202 PuAH基因利进行克隆表达,并对其部分特性进行分析.根据GenBank中发表的迟钝爱德华菌PuAH基因序列(GenBank登录号:CP001135,CDS编号:ETAE-0818)设计引物,克隆并通过表达载体pET32a重组表达该基因所编码的蛋白,纯化表达产物并制备兔抗血清,采用ELISA、Western blotting、溶血试验、菌体凝集试验分析所得融合蛋白的特性.结果显示:所得融合蛋白主要以可溶性蛋白的形式表达,蛋白分子质量约为42 ku;具有免疫原性和抗原性,对鳗鲡红细胞不具溶血性,但融合蛋白抗血清对EIB202膜蛋白提取物的溶血性有一定的抑制作用,且可以凝集EIB202菌体.

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