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流感病毒感染星型胶质细胞条件上清对正常胶质细胞的免疫生物学影响

摘要

本研究从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞,并进一步纯化星形胶质细胞和小胶质细胞,经纯度鉴定后,用感染复数为2的流感病毒H1N1和H3N2进行体外感染星型胶质细胞,分别于感染后6小时和24小时收获感染的条件培养上清,并采用超滤分子截留的方法去除流感病毒颗粒。Real-time PCR结果显示不同时间点的条件上清皆可诱导正常胶质细胞的促炎症因子IL-1, IL-6, TNF-a和趋化因子IP-10的转录水平发生不同程度的上调,CCK-8结果显示条件上清可显著抑制正常胶质细胞的活性,Western Blotting法检测结果表明条件上清液刺激可诱导星形胶质细胞后GFAP蛋白表达水平发生上调,ELISA法检测结果表明条件上清液刺激星形胶质细胞后促炎细胞因子TNF-a、IL-1p、IL-6在不同时间点的蛋白表达水平发生不同程度改变且总体呈下降趋势,Trans well法检测结果表明条件上清刺激未诱导小胶质细胞的迁移率发生显著改变。

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