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以嗜盐古生菌Haloarcula hispanica淀粉酶基因启动子为基础的跨域表达载体pAJ的构建

摘要

研究通过对现有细菌和嗜盐古菌穿梭载体pAB进行改造,构建了一个大小合适、使用方便的细菌和嗜盐古菌跨域穿梭表达载体pAJ。分别以来自细菌的氯霉素抗性基因和蛋白酶基因,及来自嗜盐古生菌的β-半乳糖苷酶基因和淀粉酶基因对nAJ进行功能验证,分别在两域中检测到蛋白的表达,且相同基因插入多克隆位点不同位置时蛋白表达量不存在显著差异。尝试pAJ在两域中启动同一个来自嗜盐古生菌基因DnaK,在两域中均能检测到来自古生菌DnaK蛋白的表达。pAJ载体的构建成功为基因跨域表达和蛋白功能的研究提供了一个新的选择工具。

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