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月季RcHSP70基因表达提高大肠杆菌对非生物胁迫的耐性

摘要

月季品种耐热性存在差异,夏季高温致使不耐热月季品种不开花.从耐热月季品种中克隆热激蛋白基因,以期阐明月季耐热的分子机理,为改善月季品质提供有用基因;根据苹果和茶的HSP70基因两端序列设计月季RcHSP70两端兼并引物,从热激后耐热月季品种中克隆到月季RcHSP70,RT-PCR检测该基因在不同月季品种中的热激诱导表达模式;为验证月季RcHSP70基因功能,构建该基因的原核表达重组载体,转化大肠杆菌BL21,检测重组菌株对高温、低温、高盐、重金属、高pH值、氧化等非生物胁迫耐性;月季RcHSP70为编码大分子热激蛋白的基因.38℃/3h热激处理后,该基因在耐热月季品种'曼海姆宫殿'(Schloss mannieim,SM)、'彩虹'(Radio,RA)、'赌城'(Las vegas,LA)、'小女孩'(Girl,GI)中强表达,而在不耐热品种'新十全'(Kordes'Perfecta,KP)、'莱茵黄金'(Pfalzer gold,GO)弱表达或不表达,表明该基因与月季耐热性关系密切.将该基因转化E.coli BL21,重组菌株提高了对高温、低温、重金属、高盐、高pH、氧化等非生物胁迫的耐性,为月季耐热品种引种、筛选提供了理论支持.

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