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重组囊素肽的构建表达及其对禽流感灭活苗免疫效果的影响

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为了探索制备囊素活性肽的有效方法,本实验以囊素五肽和三肽的氨基酸序列为基本单元,设计了3种不同串联方式的囊素肽片段,按照大肠杆菌偏爱密码子设计引物,利用SOE-PCR技术扩增了3种的囊素肽编码基因,分别构建重组质粒pET-32a-BS1、pET-32a-BS2和pET-32a-BS3,并转化于大肠杆菌OrigamiTMB中诱导表达.SDS-PAGE电泳和Western blot结果表明,3种重组囊素肽BS1、BS2和BS3均以可溶形式存在上清液中,与天然囊素肽有相似的免疫原性.免疫效果监测表明,3种重组囊素肽在大肠杆菌中成功表达,免疫效果检测结果表明,与单独免疫灭活抗原组相比,3种重组囊素肽均能明显促进鸡血清中抗体产生,提高外周血淋巴细胞增殖能力;有2种能提高血清中细胞因子的含量.本研究获得了3种高效表达的重组囊素肽,动物实验结果为其作为免疫增强剂提供了实验依据.表达产物与禽流感灭活抗原联合免疫鸡只,进行免疫效果监测.

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来源
《中国畜牧兽医学会家禽学分会第十七次全国家禽学术研讨会》|2015年|88-95|共8页
会议地点重庆
作者
Ji Xiang-bo; 姬向波; Xu Qiu-liang; 徐秋良; Feng Xiu-li; 冯秀丽; Chen Pu-yan; 陈溥言;
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作者单位

中国畜牧兽医学会家禽分会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 S858.31:S855.3;
关键词
鸡; 禽流感; 囊素肽; 重组蛋白; 原核表达; 免疫效果;

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