绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白双抗体夹心ELISA检测方法的评价和初步应用

摘要

对本实验室建立的检测绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白(Env)的双抗体夹心ELISA方法进行敏感性、特异性、重复性的评价,检测临床样品,将该方法初步应用于临床实践,分别将羊的主要常见疫病(羊布病,口蹄疫,小反刍兽疫,羊痘,羊快疫、羊猝狙、羊黑疫和羊肠毒血病)的疫苗作为待检样品进行双抗体夹心ELISA试验,确定与制备的抗体有无交叉反应,确定方法的特异性.本实验室利用内外源性JSRV高可变区之一的胞子尾区多肽制备的抗JSRV-Env572–615绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白的特异性鼠单克隆抗体和有较多抗原表位;保守的截短囊膜蛋白JSRV-Env54–394制备的抗JSRV-Env54–394绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白的特异性兔多克隆抗体,这两种不同动物源的单克隆抗体和多克隆抗体分别做检测抗体和包被抗体,建立检测绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白双抗体夹心ELISA方法特异、稳定且灵敏快速,有利于JSRV感染羊的活体检测。

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