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重组火鸡疱疹病毒活载体插入位点US2与USlO的比较研究

摘要

火鸡疱疹病毒HVT是重组疫苗普遍使用的活载体,并且其基因组US2和US10基因经常被选作目标基因的插入位点。然而,这两个基因对重组HVT疫苗作用的差异仍不清楚。为了比较同一外源基因在这两个不同插入位点形成的重组疫苗的效力是否存在差异,本研究分别在HVT的US2和US10位点插入HPAIV H5N1的HA基因,分别获取US2重组HVT病毒(rHVT-U32-HA)和US10重组HVT病毒(rHVT-US10-HA),研究表明,rHVT-U32-HA感染鸡胚成纤维细胞形成的病毒蚀斑和生长动力学与亲本HVT相似,但rHVT-US10-HA感染鸡胚成纤维细胞却表现不同的病毒蚀斑和生长动力学特征。作为重组活疫苗的免疫效力实验表明,感染后28天,rHVT-US10-HA实验组鸡群的病毒血症水平显著低于rHVT-US2-HA实验组鸡群的。同时,用两个重组毒分别免疫1日龄鸡,然后检测两组鸡抵抗H5N1 HPAIV和MDV的效率,试验结果表明:在攻HPAIV之后,免疫rHVT-US2-HA鸡群的死亡率低于免疫rHVT-US10-HA的。此外,免疫rHVT-US2-HA鸡群的血凝抑制抗体效价高于免疫rHVT-US10-HA鸡群的。这些研究结果首次表明:US2基因位点比US10基因位点可以提供更有利的外源基因插入位点以产生重组HVT疫苗。

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