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Kryokonservierung von Zellen und Gewebe mit kontrollierter Nukleation

机译：用受控成核的细胞和组织冷冻保存

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Die Konservierung von Zellen und Gewebe in flüssigem Stickstoff ist für die Langzeitlagerung dieser Biomaterialien der Stand der Technik. Bei der Kryokonservierung müssen mehrere Faktoren wie Gefrierschutzmittelkonzentration, Kühl-/ Auftaurate und Nukleation beachtet werden, da diese Parameter gro?en Einfluss auf die überlebensrate von Zellen haben. Die Nukleation ist ein Prozess bei dem sich an einem gebildeten Eiskristall weitere Wassermoleküle ansammeln und somit der Kristall in seiner Gr??e w?chst. Dieser Prozess, auch spontane Nukleation genannt, passiert stochastisch beim Abkühlen von Flüssigkeiten. Die spontane Nukleation jedoch hat bei den meisten Zelltypen negative Auswirkungen auf die überlebensrate. Um diese zu verbessern ist eine gezielt ausgel?ste Nukleation vorzuziehen. Es gibt verschiedene Methoden, wie z.B. Elektrofreezing, ?seeding" oder chemische Induktion (z.B. kristallines Choleterol) um gezielt eine Nukleation einzuleiten. Beim Elektrofreezing wird die Eiskristallbildung mit einem hochenergetischen Impuls ausgel?st. Seeding beschreibt den Prozess bei dem ein -196°C kalter Punkt an der Wand des Kryor?hrchens induziert wird. Mit diesen Methoden kann die Nukleationtemperatur verschiedenster Zelltypen bestimmt und optimiert werden. Um den Effekt der induzierten Nukleation auf die Vitalit?t von Zellen zu bestimmen, wurden mesenchymale Stammzellen (MSCs) des Wei?büschelaffens (Callithrix jacchus) in einem gesteuerten Einfrierger?t (CM2000) unter Verwendung eines Nukleationsger?tes (Elektrofreezing, Seeding) mit verschiedenen Nukleationstemperaturen eingefroren. Die Qualit?t der derart eingefrorenen Zellen wurde nach dem Auftauen über die Membranintegrit?t durch Trypanblau-F?rbung und ihre Aktivit?t mittels Alamar Blue~? Assay bestimmt. Die Funktionalit?t der Stammzellen wurde durch ihre Differenzierung in Knochen- bzw. Fettzellen ermittelt.
机译：液氮中的细胞和组织的保存是用于现有技术的这些生物材料的长期储存。对于冷冻保存，必须观察到若干因素，例如冷冻浓度，冰箱和成核，因为这些参数对细胞的存活率有很大影响。成核是一种方法，其中进一步的水分子在形成的冰晶上积聚，因此晶体尺寸的晶体。该过程，也称为自发成核，在冷却液体时通过随机。然而，自发成核对大多数细胞类型的存活率产生负面影响。为了改善这是一个专门遍历的成核。存在不同的方法，例如电reecing ,?播种“或化学诱导（例如结晶胆碱），具体地引发成核。当电热是具有高能脉冲的冰晶形成时？圣播种描述了该过程冷点在乳胶的壁上引起冷点。通过这些方法，可以确定和优化各种细胞类型的成核温度。为了确定诱导成核对细胞活力的影响，使用具有不同成核温度的核（冷冻，播种）在受控的冷冻箱（CM2000）中使用白色的间充质干细胞（MSCs）。（CM2000），具有不同的成核温度。这种冷冻细胞的质量通过膜解冻后诚信由台球蓝色Fahrung及其使用Alamar Blue〜的活动~~~~~~~。功能它Δt干细胞通过它们在骨或脂肪细胞中的分化来确定。

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