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【24h】

クライオ電子顕微鏡を用いたギャップ結合チャネルの構造研究

机译:高胶电子显微镜间隙耦合通道的结构研究

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摘要

ギャップ結合チャネルは多細胞生物に存在する細胞間コミュニケーションチャネルであり、隣接細胞の細胞質同士を直接連絡することによって電気的および化学的なカップリングを実現している。この機能は心筋細胞の電気的同調、胚発生、受胎能力、免疫系など、様々な生物学的プロセスに関与しており、このチャネルの機能不全はヒトでは難聴や白内障などの遺伝疾患の原因にもなっている。ギャップ結合チャネルを構成するタンパク質には 2 つの遺伝子ファミリーが存在する。脊椎動物を含む脊索動物に存在するコネキシンと無脊椎動物が持つイネキシンがあり、両者には有意なアミノ酸配列の類似性が見られない。12 量体構造のconnexin-26(Cx26)はN末端の作るファネル構造がチャネルの透過活性に重要であることがX線結晶構造解析から示されている[1]。イネキシンでは線虫の持つinnexin-6(INX-6)の16量体構造と、それに次ぐINX-6の原子モデルが明らかとなっている (Fig.1)。これらの構造研究にはX線や電子線を用いた結晶構造解析や、クライオ電子顕微鏡による単粒子解析といった手法が利用されてきた。今回はINX-6とCx26のギャップ結合チャネルの構造を比較しながら、2種類のギャップ結合チャネルに共通した構造と多様性を紹介する。またクライオ電子顕微鏡単粒子解析を行う上で、高分解能化に重要な役割を果たした試料調製法や最新の構造研究を紹介したい。
机译:间隙结合通道存在于多细胞生物体,和电气间的通信信道和化学偶联由相邻细胞的直接接触,细胞质细胞实现。这个功能是参与多种生物过程,如电调谐,胚胎发育,胎儿能力,和心肌细胞的免疫系统,和该信道的功能障碍是由于人类耳聋和遗传性疾病如白内障,它也是。两个基因家族存在于构成上述间隙结合通道的蛋白。有含公脊椎动物脊椎动物,连接蛋白和无脊椎动物,并显著氨基酸序列的相似性在两种不可见。连接蛋白26(Cx26基因)与12聚体结构通过X射线晶体结构分析表明N-末端官能功能是用于信道渗透性[1]重要的。和16聚体结构innexin-6(INX-6)与Inekishin线虫,INX-6原子模型已经揭示它(图1)的后面。这些结构的研究已经使用X射线和电子束,以及单个粒子分析用cryomatic电子显微镜用于晶体结构分析。这一次,我们介绍的结构和分集共用于两个间隙耦合信道,而比较INX-6和CX26间隙耦合信道的结构。此外,我们想向大家介绍的样品制备方法和最新的结构研究,在高分辨率发挥了重要作用,在执行monoparticulate电子显微镜monoparticular分析。

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