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【6h】

利用RAPD标记技术进行春小麦遗传多样性分析研究

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目录

Abstract

缩略词(Abbreviation)

1前言

2文献综述

2.1遗传多样性研究概况

2.1.1关于农艺性状的遗传多样性研究

2.1.2关于贮藏蛋白的遗传多样性研究

2.1.3关于DNA序列的遗传多样性研究

2.2分子标记研究概况

2.2.1基于Southern杂交技术的分子标记

2.2.2基于PCR(Polymerase Chain Reaction)技术的分子标记

2.2.3扩增片段长度多态性(Amplification Fragment Length Poymorphism,简称AFLP)标记

2.2.4其它新型的DNA分子标记技术

2.3 RAPD分析在小麦族中的研究概况

2.3.1 RA PD在小麦族外源易位系和近等基因系中的研究

2.3.2 RA PD在小麦族抗性基因的标记和遗传多样性上的应用

3材料与方法

3.1材料来源及种子特征

3.2小麦种子醇溶蛋白标记检测

3.2.1试剂及缓冲液的配制

3.2.2小麦醇溶蛋白的提取

3.2.3 A-PAGE的操作程序

3.3小麦叶片的分子水平(RAPD)检测

3.3.1所需试剂及缓冲液的配制

3.3.2所用主要设备的规格及产地

3.3.3小麦叶片DNA的提取及改良

3.3.4 DNA的纯度及浓度测定

3.3.5 RAPD标记稳定性探索实验

3.3.6 PCR反应体系

3.3.7扩增条件探索

3.3.8引物筛选

3.3.9扩增产物检测

3.4数据分析方法

4结果与分析

4.1小麦醇溶蛋白分析结果

4.2改良CTAB法提取DNA试验结果

4.3 DNA浓度与纯度检测结果

4.4 RAPD稳定性的实验技术探索

4.5 RAPD分析试验结果

4.5.1单引物RAPD分析

4.5.2双引物RAPD分析

5结论

6讨论

6.1改良CTAB法提取DNA的效应分析

6.2影响RAPD稳定性的实验因素

6.3单、双引物RAPD扩增结果的差异

6.4 RAPD与A-PAGE标记遗传多样性的有效性分析

参考文献

致谢

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摘要

春小麦是我国北方主要的小麦种植类型,创造抗旱抗盐新种质是春小麦育种的重要目标.利用生物技术进行种质改良是目前公认的最为有效的手段和方法,其中分子标记技术不仅因为能够有效而准确地进行杂种鉴定而成为重要的辅助育种手段,而且可以通过物种多样性测定和聚类分析比较,确定标记目标基因而受到学术界广泛重视.本研究结合具体研究条件,采用A-PAGE技术和RAPD标记技术对22个不同类型春小麦与小黑麦品种进行多态性分析和聚类比较,以建立小麦分子标记辅助育种体系,为进一步开展小麦抗性改良提供研究基础和必需的技术支撑.

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