第一部分文献综述
综述一受精过程中哺乳类动物精子质膜的动态变化
1前言
2精子质膜上的脂质及其在受精过程中的作用
2.1精子质膜脂质组成
2.2精子质膜脂质的结构
2.3精子质膜上脂质和蛋白质间的相互作用
2.4质膜的代谢和信号转导
2.5精子质膜脂质的代谢和融合
2.6精子质膜脂质的过氧化作用
3精卵相互作用中有关蛋白质的变化
3.1获能过程中精子质膜蛋白的变化
3.2与ZP结合过程中精子质膜蛋白的变化
3.3顶体反应中精子质膜蛋白的变化
4与卵膜结合和融合过程中精子质膜蛋白的变化
4.1精子头顶端与卵膜结合
4.2精子赤道区与卵膜结合
4.3精卵质膜融合
综述二整合蛋白配体ADAMs和整合蛋白在细胞结合和受精过程中的作用
1前言
2 ADAMs的性质和特点
3整合蛋白及其配体间的相互作用
3.1整合蛋白的种类
3.2整合蛋白的结构
4 ADAMs、整合蛋白和受精
4.1精子上的去整合蛋白
4.2受精蛋白
4.3精子上的整合蛋白
4.4卵子表面的整合蛋白
5整合蛋白及其配体在精子和卵子质膜的结合和融合中的作用
5.1卵子上存在一种新的α 6 β 1活性物质
5.2细胞生物学和基因敲除小鼠上发现的精子细胞膜上的大分子膜复合体
5.3精卵结合的生物化学和生物物理学研究进展
第二部分实验研究
实验总体方案
实验一一种sp18族精子膜蛋自基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果
2.1阳性噬菌体的筛选
2.2 PGEM-3zf(+)-sp18cDNA测序质粒的构建
2.3 sp18cDNA测序及特征分析
2.4 原核表达载体的构建及表达
2.5原核表达载体的原核诱导表达及western blot分析
3讨论
实验二编码sp18蛋白mRNA的组织特异性表达及其sp18抗原在小鼠和牛精子表面的定位及sp18多抗对牛和小鼠精子活力的影响
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果
2.1 Northern杂交用探针的扩增及标记
2.2小鼠7种组织总RNA的提取及northern blot
2.3 rsp18 IgG对小鼠和牛精子活力的影响
2.4应用sp18mAb和rsp18 IgG对小鼠精子表面sp18抗原的定位
3讨论
实验三sp18与mbpro融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达
1材料和方法
1.1材料
1.2bpro基因的扩增
1.3 sp18精子膜蛋白基因和牛精蛋白基因融合基因原核表达载体pET-30a(+)-sp18/mbpro的构建
1.4重组pET-30a(+)-sp18/mbpro的表达及表达产物的分离纯化
1.5重组sp18/mbpro融合蛋白的SDS-PAGE电泳及western blot分析
2结果
2.1构建融合基因用bpro基因的扩增
2.2sp18精子膜蛋白基因和牛精蛋白基因融合基因原核表达栽体pET-30a(+)-sp18/mbpro的构建
2.4sp18/mbpro融合基因的诱导表达及表达产物的纯化
3讨论
实验四sp18/mbpro融合蛋白介导小鼠和牛精子结合外源DNA能力的检测
1材料与方法
1.1材料
1.2方法
2结果
2.1sp18/mbpro融合蛋白与DNA结合的凝胶滞后试验
2.2获能前后小鼠和牛精子结合外源DNA能力
2.3“sp18/mbpro-sp18mAb”介导精子结合外源DNA的能力
3讨论
结论
将来工作打算
参考文献
附图
致谢
中国农业大学;
