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洋槐蜜中多酚类化合物提取方法及提取物种类研究

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摘要

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第一章 引言

1.1 蜂蜜的介绍

1.2 蜂蜜功能活性的研究

1.2.1 蜂蜜的抑菌作用

1.2.2 蜂蜜的抗氧化作用

1.2.3 蜂蜜的血糖调节作用

1.2.4 蜂蜜的胃肠道调节作用

1.3 蜂蜜中多酚类化合物

1.3.1 酚酸类化合物

1.3.2 黄酮类化合物

1.4 蜂蜜中多酚类化合物提取分析方法

1.4.1 溶剂提取法

1.4.2 树脂提取法

1.4.3 固相萃取法(SPE法)

1.4.4 其他类型提取法

1.5 中国蜂蜜的质量现状

1.6 论文的研究意义

1.7 论文的主要内容

第二章 大孔树脂提取蜂蜜多酚类化合物的研究

2.1 材料与方法

2.1.1 材料与试剂

2.1.2 仪器与设备

2.1.3 方法

2.2 结果与分析

2.2.1 大孔树脂对多酚类化合物吸附率的测定结果

2.2.2 大孔树脂对多酚类化合物回收率的测定结果

2.2.3 大孔树脂吸附多酚类化合物的动力学特性

2.3 本章小结

第三章 固相萃取柱提取洋槐蜜中多酚类化合物的研究

3.1 材料与方法

3.1.1 材料与试剂

3.1.2 仪器与设备

3.1.3 方法

3.2 结果与分析

3.2.1 模拟蜂蜜溶液中多酚类化合物在不同固相萃取柱中的回收率

3.2.2 洋槐蜜中多酚类化合物的鉴定

3.2.3 不同固相萃取柱提取洋槐蜜中多酚类化合物的分析

3.3 本章小结

第四章 洋槐蜜样品中多酚类化合物及其指纹图谱构建

4.1 材料与方法

4.1.1 材料与试剂

4.1.2 仪器与设备

4.1.3 方法

4.2 结果与分析

4.2.1 洋槐蜜样品中多酚类化合物的分析

4.2.2 指纹图谱的构建

4.3 本章小结

第五章 市售洋槐蜜中多酚类化合物及其抗氧化活性研究

5.1 材料与方法

5.1.1 材料与试剂

5.1.2 仪器与设备

5.1.3 方法

5.2 结果与分析

5.2.1 总酚和总黄酮标准曲线的制作

5.2.2 市售洋槐蜜总酚和总黄酮含量的测定

5.2.3 市售洋槐蜜抗氧化能力的测定

5.2.4 市售洋槐蜜多酚类化合物分析

5.3 本章小结

第六章 全文总结

参考文献

致谢

作者简介

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摘要

蜂蜜的主要成分是碳水化合物和水,也含有少量的氨基酸、矿物质和多酚类化合物等。蜂蜜具有抗菌、抗氧化、抗炎等多种生物活性。目前研究表明这些生物活性与其含有的多酚类化合物具有一定的相关性。本文主要研究了洋槐蜜中多酚类化合物。
  通过分析模拟蜂蜜溶液中咖啡酸和芦丁的回收率,比较了6种不同类型大孔树脂对多酚类化合物的提取能力。结果显示各种树脂对咖啡酸和芦丁的回收率普遍偏低,其中AB-8大孔树脂具有最高的咖啡酸回收率,为11.79%; HPD200大孔树脂具有最高的芦丁回收率,为37.15%; XAD-2大孔树脂兼顾了两种物质的回收率,吸附效果相对较好。吸附动力学特性显示,大孔树脂在咖啡酸吸附方面属于缓慢吸附型,在芦丁吸附方面属于快速吸附型。对比大孔树脂,所有的固相萃取(SPE)柱均具有相对较高的咖啡酸和芦丁回收率,并且反相-阴离子交换固相萃取(RP-AE SPE)柱在模拟蜂蜜溶液中对咖啡酸和芦丁的回收率均高于反相固相萃取(RP SPE)柱。咖啡酸在RPSPE柱中最高回收率为88.36%,在RP-AE SPE柱中最高回收率为92.86%;芦丁在固相萃取柱中的回收率均大于90%。
  经过8种不同固相萃取柱提取洋槐蜜中多酚类化合物,结果表明使用不同SPE柱的提取物中多酚类化合物在种类和含量方面都存在不同。RPAPE柱中洋槐蜜提取物平均总酚含量为326.17μg/100g,平均总黄酮含量为289.60μg/100g,平均脱落酸含量为121.42μg/100g; RP-AE SPE柱中平均总酚含量为375.15μg/100g,平均总黄酮的含量为318.49μg/100g,平均脱落酸含量为121.05μg/100g。整体而言,RP-AE SPE柱提取多酚类化合物的效果明显优于RP SPE柱,并且Strata-X-A柱在所有固相萃取柱对洋槐蜜多酚类化合物提取效果最好。
  HPLC-DAD分析了经不同固相萃取柱提取的洋槐蜜中多酚类化合物。结果表明,从洋槐蜜中鉴定出21种化合物,包括1种脱落酸、12种酚酸及其酯类和8种黄酮类化合物。通过中药指纹图谱系统建立了洋槐蜜样品多酚类化合物的指纹图谱,确定了洋槐蜜特征性成分,所有洋槐蜜样品与指纹图谱的相似度范围为0.748-0.967。分析了不同地区市售洋槐蜜的抗氧化性能及其多酚类化合物,结果表明15种洋槐蜜样品均具有抗氧化活性,且15种市售洋槐蜜质量参差不齐,存在明显的质量差异。

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