形成三链DNA的寡核苷酸抑制内皮细胞TF表达的实验研究

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脑血栓形成是最常见的脑血管疾病之一. 近年来,组织因子(Tissue factor,TF)在促凝中的作用日益受到关注.该文欲设计合成筛选在生理环境中能特异性地内皮细胞TF基因启动子区SSRE结合的TFO与SSRE结合成三链DNA,阻止SSRE与切应力诱导的Egr-1和Sp1结合,从而阻止SSRE激活,导致TF基因转录不能启动,TF表达因而受到抑制,到达阻断切应力诱导的血栓形成.该实验针对SSRE的3个Sp1/Egr-1位点的DNA序列,设计合成TFO,采用电泳迁移分析筛选亲和性最高的TFO、进行硫代磷酸酯修饰,通过同位素标记TFO,测定其细胞内的cpm值,确定其透膜性、耐酶性及亚细胞分布,利用免疫细胞化学和原位杂交方法结合图像分析,以及TF促凝活性测定初步确定TFO的抑制效果,同时利用F-actin和G-actin荧光染色确定切应力作用的可靠性和稳定性.

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作者
李黔宁;
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作者单位

第三军医大学;

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授予单位第三军医大学;
学科人体解剖学
授予学位博士
导师姓名应大君;
年度 2001
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类脑栓塞;
关键词
组织因子; 转录因子Sp1; 转录因子Egr-1; 切应力反应元件; 脑血栓形成; 形成三链DNA的寡核苷酸;

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