槲皮素对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠肺中小动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

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[目的]
　　 1、观察槲皮素对野百合碱(MCT)诱导的大鼠肺动脉高压的影响。
　　 2、观察槲皮素对肺动脉高压大鼠肺血管中小动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的作用,探讨槲皮素降低肺动脉压的可能机制。
　　 [方法]
　　成年雄性SD大鼠40只随机分为4组:正常对照组(对照组)、MCT诱导的肺动脉高压组(MCT组)、槲皮素预防组(预防组)和槲皮素治疗组(治疗组),每组10只。MCT组:一次性皮下注射野百合碱(50mg/kg),再以生理盐水(2ml/d)每日灌胃一次,共20天。对照组:一次性皮下注射与野百合碱相等容量的生理盐水,再以生理盐水(2ml/d)每日灌胃一次,共20天。预防组:一次性皮下注射野百合碱(50mg/kg),同时给予槲皮素100mg/(kg.d)每日灌胃一次,共20天。治疗组:一次性皮下注射野百合碱(50mg/kg)饲养20天后,以槲皮素100mg/(kg.d)每日灌胃一次,共20天。到达实验终点后,右心导管检查测定大鼠平均肺动脉压力(meanpulmonary arterial pressure,mPAP);苏木素-伊红(HE)染色观察肺中小动脉中膜厚度占血管外径百分比(MT％)及中膜面积占血管壁总面积的百分比(MA%);免疫组化法观察并计算大鼠肺中小动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原(Proliferating CellNuclear Antigen,PCNA)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-celllymphoma/leukemia-2,Bcl-2)抗原表达水平;免疫印迹法(Western Blot)观察肺中小动脉中膜PCNA和Bcl-2蛋白的表达。
　　 [结果]
　　 1、mPAP比较:
　　 MCT组大鼠的mPAP与对照组、预防组、治疗组之间比较差异具有显著性,MCT组大鼠的mPAP显著高于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)、治疗组(P＜0.05);预防组大鼠的mPAP与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);治疗组大鼠的mPAP与对照组、预防组比较差异具有显著性,治疗组大鼠的mPAP高于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)。
　　 2、HE结果显示:
　　对照组和预防组大鼠肺中小动脉管壁薄,管腔大;MCT组大鼠肺中小动脉管壁厚度明显增加,管腔面积较小;治疗组大鼠肺中小动脉中膜厚度及中膜面积介于MCT组和对照组之间。
　　 3、图像分析:
　　 (1)MCT组大鼠的MT%与对照组、预防组、治疗组之间比较差异具有显著性,MCT组大鼠的MT%显著高于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)、治疗组(P＜0.05);预防组大鼠的MT%与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);治疗组大鼠的MT%与对照组、预防组比较差异具有显著性,治疗组大鼠的MT%高于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)。
　　 (2)MCT组大鼠的MA%与对照组、预防组、治疗组之间比较差异具有显著性,MCT组大鼠的MA%显著高于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)、治疗组(P＜0.05);预防组大鼠的MA%与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);治疗组大鼠的MA%与对照组、预防组比较差异具有显著性,治疗组大鼠的MA%高于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05).
　　 4、PCNA增殖度(PCNA%)显示:
　　 MCT组大鼠肺中小动脉平滑肌细胞PCNA%与对照组、预防组、治疗组之间比较差异具有显著性,MCT组大鼠的PCNA%显著高于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)、治疗组(P＜0.05);预防组大鼠的PCNA%与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);治疗组大鼠的PCNA%与对照组、预防组比较差异具有显著性,治疗组大鼠的PCNA%高于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)。
　　 5、Bcl-2凋亡度(Bcl-2%)显示:
　　 MCT组大鼠肺中小动脉平滑肌细胞Bcl-2%与对照组、预防组、治疗组之间比较差异具有显著性,MCT组大鼠的Bcl-2%高于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)、治疗组(P＜0.05);预防组大鼠的Bcl-2%与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);治疗组大鼠的Bcl-2%与对照组、预防组比较差异具有显著性,治疗组大鼠的Bcl-2%低于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)。
　　 6、Western Blot结果:
　　 (1)PCNA蛋白表达显示:MCT组大鼠肺中小动脉平滑肌细胞PCNA蛋白表达与对照组、预防组、治疗组之间比较差异具有显著性,MCT组大鼠的PCNA蛋白表达显著高于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)、治疗组(P＜0.05);预防组大鼠的PCNA蛋白表达与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);治疗组大鼠的PCNA蛋白表达与预防组、对照组比较差异有显著性,治疗组高于预防组(P＜0.05)和对照组(P＜0.05);。
　　 (2)Bcl-2蛋白表达显示:MCT组大鼠肺中小动脉平滑肌细胞Bcl-2蛋白表达与对照组、预防组、治疗组之间比较差异具有显著性,MCT组大鼠的Bcl-2蛋白表达高于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)、治疗组(P＜0.0.5);预防组大鼠的Bcl-2蛋白表达与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);治疗组大鼠的Bcl-2蛋白表达与对照组、预防组比较差异具有显著性,治疗组大鼠的Bcl-2蛋白表达低于对照组(P＜0.05)、预防组(P＜0.05)。
　　 [结论]
　　 1、槲皮素对MCT诱导的大鼠肺动脉高压有预防和治疗作用。
　　 2、槲皮素能够通过抑制MCT诱导的大鼠肺血管中小动脉平滑肌细胞增殖和促进其凋亡,改善肺血管重构。

著录项

作者
庞玲品;
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作者单位

广东医学院;

展开▼
授予单位广东医学院;
学科内科学(心血管)
授予学位硕士
导师姓名黄石安;
年度 2010
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类药物疗法、化学疗法;
关键词
槲皮素; 野百合碱; 肺动脉高压; 肺中小动脉平滑肌; 细胞周期;

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