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傅里叶变换近红外光谱法结合化学计量学技术快速测定还原型谷胱甘肽片的方法学研究

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还原型谷胱甘肽片(reduced glutathione tablets)的临床应用广泛,主要用于治疗肝损害、抗病毒和抗帕金森病等。目前,还原型谷胱甘肽片的含量测定方法主要有HPLC法和UV法。但这些方法的样品预处理繁琐,且须破坏样品、使用化学试剂,耗时,不能用于过程分析。傅里叶变换近红外漫反射光谱法(diffuse reflectance Fouriertrlnsform near infrared spectroscopy,diffuse reflectance FT-NIR)结合化学计量学(chemometrics),可快速、无损地测定固体样品,可用于过程分析。本研究采用漫反射FT-NIR法,结合化学计量学技术,以HPLC法的测定结果为参考值,建立还原型谷胱甘肽片的快速含量测定方法,以期用于质量控制和过程分析。采用交叉验证均方根误差(root meansquare error of cross validation,RMSECV)、预测均方根误差(root meansquare error of prediction,RMSEP)及预测集的相关系数(correlationcoefficient,R)对所建模型进行评价。
　　 目的：⑴建立还原型谷胱甘肽片含量的FT-NIR积分球漫反射光谱快速测定法,用于质量控制。⑵建立还原型谷胱甘肽片含量的FT-NIR光纤漫反射光谱快速测定法,用于过程分析。
　　 方法：①采用FT-NIR光谱仪的积分球附件测量光谱。测量条件:扫描范围10000～4000cm-1;扫描次数64;分辨率8cm-1;温度(22±1)℃;湿度(55±5)％RH。②采用FT-NIR光谱仪的光纤附件测量光谱。测量条件:扫描范围10000～4000cm-1;扫描次数32;分辨率8 cm-1;温度(22±1)℃;湿度(55±5)%RH。③色谱柱C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相0.1%三氟乙酸-乙腈(98:2),柱温30℃,流速1ml/min,检测波长210 nm,进样量20μl。④分别从FT-NIR积分球和光纤漫反射光谱中选择光谱区域,进行光谱预处理,建立PLS和BP-ANN模型;分别采用RMSECV、RMSEP及预测集R验证模型。
　　 结果：⑴PLS含量预测模型的建立与验证:采用主因子数5建立PLS模型,RMSECV为0.02413、RMSEP为0.00857、预测集尺为0.97254。⑵BP-ANN含量预测模型的建立与验证:网络结构参数为(11,5,1),RMSECV为0.02673,RMSEP为0.02808,预测集尺为0.63906。⑶PLS含量预测模型的建立与验证:采用主因子数7建立PLS模型,RMSECV为0.03403,RMSEP为0.01000,预测集尺为0.93311。⑷BP-ANN含量预测模型的建立与验证:网络结构参数为(8,4,1),RMSECV为0.04043,RMSEP为0.02123,预测集尺为0.80131。
　　 结论：①所建FT-NIR积分球漫反射光谱PLS模型可用于质量控制,以快速预测还原型谷胱甘肽片的含量。②所建FT-NIR光纤漫反射光谱PLS模型可用于过程分析,以快速预测还原型谷胱甘肽片的含量。

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