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300例心源性猝死案例的回顾性分析及应激对心肌Cx43影响的实验研究

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第一部分 300例心源性猝死案例的回顾性分析

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 结论

第二部分 应激对小鼠心肌Cx43表达及磷酸化水平影响的实验研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4.结论

参考文献

综述：缝隙连接蛋白Cx43与心血管疾病的研究进展

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摘要

目的：回顾性分析法医病理实际检案中心源性猝死的案例；探讨应激对心肌Cx43蛋白表达及其磷酸化水平的影响，旨在为应激引发的心脏性猝死案例的法医病理诊断提供实验依据。
　　方法:收集贵阳医学院法医司法鉴定中心2009年至2013年法医病理检案中的心源性猝死案例300例，对其年龄、性别、死亡时间、死因及诱因等流行病学特点进行回顾性分析。根据不同死因筛选出2组，即应激引发的心性猝死组和对照组各5例，收集其存档心肌蜡块制片后进行Cx43免疫组化染色。建立应激小鼠模型及心性猝死小鼠模型，实验中期应激刺激后检测应激组小鼠及对照组小鼠血浆中儿茶酚胺水平。实验末次应激后，取各组小鼠心脏进行常规HE染色，免疫组化染色检测心肌Cx43的表达分布，并应用蛋白质印迹技术检测心肌Cx43的磷酸化水平。
　　结果：多数的心源性猝死案例是由应激引发（占62.3％）。以往病理检案存档心肌蜡块Cx43组化染色效果及定位不佳。应激刺激后应激组小鼠血浆CA水平(368.48±19.89ng/L)较对照组(201.14±15.57ng/L)明显增高。小鼠心肌Cx43免疫组化检测发现：对照组Cx43在心肌闰盘处呈棕色条状染色，与心肌纵轴垂直，分布均匀；应激组及心性猝死组心肌Cx43出现不同程度的缺染或弱染，阳性染色分布不均。各组Cx43阳性染色的累计光密度（IOD）分别为：对照组（26637.10±2604.98）、应激组（21711.93±2844.45）及心性猝死组（11126.25±3305.51），三组心肌Cx43表达的IOD值相比，存在显著性差异；各组Cx43阳性染色的面积（S）分别为：对照组（134828.43±8505.73）、应激组（117187.53±13024.78）及心性猝死组（71097.77±7302.77），三组心肌Cx43表达的S值相比，存在显著性差异。心肌Cx43蛋白质印迹检测：各组心肌Cx43磷酸化水平分别为：对照组（476.28%±14.76%）、应激组（432.23%±25.17%）及心性猝死组（188.69%±22.95%），三组心肌Cx43磷酸化水平相比，存在显著性差异。
　　结论：应激是心源性猝死发生的重要的危险因素。法医尸检标本的收集时限、固定及保存方法对后期进行分子生物学指标的检测有重要影响。动物实验表明应激组与心性猝死组均存在心肌缺血之病理改变。心肌Cx43的表达分布及磷酸化水平的异常可反映出心电活动的异常，对诊断和解释某些猝死（如应激引发的心性猝死案例）具有重要参考意义。

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