白纹伊蚊唾液腺Antigen-5基因家族成员生物信息学分析与原核表达载体的构建

代理获取

页面导航

目录
摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

[目的]Antigen-5基因家族成员广泛存在于吸血节肢动物唾液转录组中。我们前期的研究结果显示吸血可以调控白纹伊蚊Antigen-5基因家族成员(Ab-AG3)的表达。为进一步探讨Ab-AG3基因在蚊虫吸血传病中的作用，本研究利用生物信息学分析比较Antigen-5家族4个基因的异同，筛选出Ab-AG3和Ab-AG4基因进行实时荧光定量PCR检测它们在唾液腺、脂肪体和中肠中的表达量，并构建了Ab-AG3原核表达载体，为下一步表达和功能研究奠定基础。
　　[方法]采用生物信息学方法对白纹伊蚊Ae.albopictus雌蚊唾液腺中识别出的Antigen-5基因家族4个成员（Ab-AG1、Ab-AG2、Ab-AG3和Ab-AG4）进行生物信息学分析；进而采用实时荧光定量PCR技术检测了Ab-AG3、Ab-AG4基因在唾液腺、中肠和脂肪体中的表达。最后通过基因工程技术构建原核表达载体。
　　[结果]在Ae.albopictus雌蚊唾液腺cDNA文库中共识别出4条编码Antigen-5基因家族的成员，分别是：Ab-AG1（AAV90675.1）基因全长783bp编码260个氨基酸；Ab-AG2（AAV90676.1）基因全长783bp编码258个氨基酸；Ab-AG3（AAV90677.1）基因全长768bp编码255个氨基酸和Ab-AG4（AAV90699.1）基因全长771bp编码256个氨基酸。它们都是碱性蛋白，分子量均在28000-30000之间，都具有1个SCP结构域。通过氨基酸多重序列比对后聚类分析，发现基因Ab-AG1和Ab-AG4、Ab-AG2和Ab-AG3分别隶属于两个分支，前者包括库蚊属、伊蚊属及按蚊属蚊虫，后者只包括库蚊属和伊蚊属蚊虫；三维模建显示两分支的蛋白有显著结构差异。进一步从两个分支中各挑选出Ab-AG4与Ab-AG3两个基因检测它们在唾液腺、中肠和脂肪体3种组织中的表达量，发现两个蛋白均在蚊虫唾液腺中特异高表达。最后成功从蚊虫唾液腺中克隆获得Ab-AG3和Ab-AG4全长序列，并构建pET-30a（+）-Ab-AG3重组表达载体。
　　[结论]证实了Ab-AG3和Ab-AG4这两个蛋白特异表达在白纹伊蚊雌蚊唾液腺中，并成功构建pET-30a（+）-Ab-AG3重组表达载体。

著录项

作者
袁晓庆;
展开▼
作者单位

贵阳医学院;

展开▼
授予单位贵阳医学院;
学科病原生物学
授予学位硕士
导师姓名吴家红;
年度 2013
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类蚊、白蛉;
关键词
白纹伊蚊; 唾液腺; Antigen-5基因; 原核表达; 家族成员; 生物信息学;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 坛紫菜HSP20基因家族成员的全基因组鉴定及生物信息学分析 [J] . 张宛晨 ,朱静 ,易乐飞 . 南方农业学报 . 2021,第006期
2. 芒果VOZ转录因子基因家族成员鉴定及生物信息学分析 [J] . 刘志鑫 ,孙宇 ,叶子 . 南方农业学报 . 2021,第007期
3. 芒果VOZ转录因子基因家族成员鉴定及生物信息学分析 [J] . 刘志鑫 ,孙宇 ,叶子 . 南方农业学报 . 2021,第007期
4. 白菜NPF基因家族成员的鉴定及其生物信息学分析 [J] . 马嘉俊 ,吴英华 ,李璿 . 河南农业科学 . 2021,第009期
5. 坛紫菜HSP20基因家族成员的全基因组鉴定及生物信息学分析 [J] . 张宛晨 ,朱静 ,易乐飞 . 南方农业学报 . 2021,第006期
6. 毛竹IDD基因家族的生物信息学分析 [C] . CHEN wei ,陈炜 ,GUO Xiao-qing . 第十三届中国竹业学术大会 . 2017
7. 玉米邻甲基转移酶基因的克隆、原核表达载体构建及其生物信息学分析 [A] . 艾哈迈德 . 2015

白纹伊蚊唾液腺Antigen-5基因家族成员生物信息学分析与原核表达载体的构建

目录

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅