AtST39和AtST39H在盐胁迫干旱胁迫中的功能研究

声明

摘要

缩略词

第一章 前言

1．1 逆境胁迫与植物的抗逆途径

1．1．1 盐胁迫与植物的抗盐途径

1．1．2 干旱胁迫与植物的抗旱途径

1．2 植物主要抗逆信号转导途径

1．2．1 植物体内保守的MAPK信号通路

1．2．2 植物生长素信号转导途径

1．2．3 植物ABA信号转导途径

1．3 拟南芥DUF966基因家族研究现状

1．4 本研究的意义和内容

第二章 材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 植物材料

2．1．2 菌株与质粒

2．1．3 主要试剂及耗材

2．1．4 培养基

2．2 实验方法

2．2．1 引物设计及合成

2．2．2 拟南芥种植与收种方法

2．2．3 目的基因的逆境表达谱和对激素的响应

2．2．4 目的基因克隆与载体构建

2．2．5 农杆菌介导的拟南芥遗传转化

2．2．6 转基因阳性植株的筛选与鉴定

2．2．7 纯合突变体的鉴定筛选

2．2．8 组织染色与亚细胞定位观察

2．2．9 AtST39H原核表达与蛋白纯化

2．2．10 拟南芥杂交实验与杂交纯合体鉴定筛选

2．2．11 拟南芥盐胁迫、激素处理对根长影响

2．2．12 转基因植株的耐盐、耐干旱表型分析

2．2．13 转基因植株逆境相关基因的表达分析

第三章 实验结果

3．1 AtST39基因

3．1．1 AtST39基因在非生物胁迫、激素处理下的表达模式分析

3．1．2 GFP融合表达载体和GUS融合表达载体的构建

3．1．3 农杆菌介导的拟南芥遗传转化

3．1．4 转基因植株的筛选鉴定

3．1．5 AtST39基因在拟南芥各组织器官中的表达模式分析

3．1．6 AtST39蛋白的亚细胞定位分析

3．1．7 AtST39基因相关转基因植株鉴定

3．1．8 NaCl抑制AtST39干扰株系AtST39-RNAi6的主根生长

3．1．9 转基因植株耐盐、耐干旱表型分析

3．1．10 转基因植株与DR5∷GUS的杂交实验

3．1．11 转基因植株逆境相关基因的表达情况

3．2 AtST39H基因

3．2．1 AtST39H基因在非生物胁迫、激素处理下的表达模式分析

3．2．2 GFP融合表达载体和GUS融合表达载体的构建

3．2．3 农杆菌介导的拟南芥遗传转化

3．2．4 转基因植株的筛选鉴定

3．2．5 AtST39H基因在拟南芥各组织器官中的表达模式分析

3．2．6 AtST39H蛋白的亚细胞定位分析

3．2．7 AtST39H基因T-DNA插入突变体的鉴定

3．2．8 NaCl胁迫对AtST39H突变体5-5的主根长度的影响

3．2．9 转基因植株耐盐、耐干旱表型分析

3．2．10 转基因植株逆境相关基因的表达情况

3．2．11 AtST39H原核表达与包涵体蛋白纯化

3．3 AtST39与AtST39H之间的相互联系

3．3．1 AtST39与AtST39H蛋白相似性很高

3．3．2 转基因植株中另一基因表达量分析

3．3．3 双突变体的获得和表型分析

3．3．4 纯合双突变体中相关基因的表达

第四章 讨论

4．1 AtST39基因功能分析

4．2 AtST39H基因功能分析

4．3 AtST39和AtST39H可能存在相互联系

第五章 小结

第六章 不足与展望

参考文献

致谢