产酸克雷伯氏菌（Klebsiella oxytoca）HP1高效产氢工程菌的构建

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声明

1前言

1.1概述

1.1.1氢能

1.1.2氢的制备

1.2生物制氢

1.2.1光合法生物制氢技术

1.2.2发酵法生物制氢技术

1.2.3高产氢基因工程菌研究

1.3本论文的研究内容与目的

2材料与方法

2.1材料

2.1.1菌种与质粒

2.1.2引物

2.1.3主要试剂

2.1.4主要仪器

2.1.5常用培养基

2.1.6常用溶液的配制

2.2实验方法

2.2.1常规实验操作

2.2.2 K.oxytoca HP1多效基因adhE-突变株的构建

2.2.3 K.oxytoca HP1乳酸脱氢酶基因LDHa-突变株的构建

3结果与分析

3.1 K.oxytooa HP1多效基因adhE-突变株的构建

3.1.1 1281bp adhE基因部分序列的扩增

3.1.2 K.oxytoca HP1对链霉素的抗性

3.1.3 adhE同源整合质粒pTA-Str的构建

3.1.4 adhE-突变株的构建

3.1.5 adhE-突变株的生长特性和产氢、产乙醇特性变化

3.2 K.oxytoca HP1乳酸脱氢酶基因LDHa-突变株的构建

3.2.1 882bp LDHa基因部分序列的扩增

3.1.2K.oxytoca HP1对四环素的抗性

3.2.3 LDHa同源整合质粒pLDH-Tr的构建

3.2.4 LDHa-突变株的构建

3.2.5 LDHa-突变株的生长特性和产氢特性变化

4结论与讨论

参考文献

致谢