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青藤碱对大鼠心脏移植急性排斥反应及血清透明质酸的影响

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目录

论文说明:缩略语

摘要

前 言

材料与方法

1药口与试剂

2器械与仪器

3实验动物

4实验方法

5排斥反应的诊断和分级

6透明质酸放射免疫测定

7统计学处理

结 果

1术后动物一般情况

2移植物形态学变化

3各组血清HA的浓度

讨 论

小 结

附 图

参考文献

致 谢

附 录

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摘要

目的:心脏移植是治疗终末期心脏疾病的有效方法之一,已被许多医院采用。但是急性排斥反应的发生,以及如何有效地检测和防治急性排斥反应,是关系到心脏移植成败的关键问题。本实验试图了解青藤碱(sinomenine SIN)在大鼠心脏移植急性排斥反应的作用,及血清透明质酸(hyaluronan HA)在心脏移植后的变化,及其是否可以作为心脏移植排斥指标。 材料与方法:选用清洁级雄性Wistar,SD大鼠分别作为供体及受体,各24只,体重250-300g,建成腹部异位心脏移植模型后,随机分为2组:对照组,实验组(SIN)组,每组12只。 采用改良Ono术式,2%戊巴比妥腹腔注射麻醉。受体开腹,分离肾静脉以下腹主动脉与下腔静脉1cm左右备用,无菌温盐水纱布覆盖。供体麻醉,由阴茎里背静脉注射肝素,全身肝素化后,开胸、心脏表面置冰屑降温,升主动脉顾行灌0-4℃心脏停跳液5-10ml,心脏在体停跳,结扎血管后,取心脏于0-4℃平衡液中。吻合方法:将供心主动脉、肺动脉分别与受体腹主动脉、下腔静脉行端侧吻合,开放后,移植心冠状动脉血液灌注,自动复跳。止血后缝合腹部切口,保温待动物自然苏醒。动物模型成功的标志,移植心搏动72小时。实验组大鼠给予青藤碱30 mg/kg/day.i.p.,对照组给予生理盐水0.5 ml/day.i.p。各组每天触摸腹部,观察移植心搏动情况。分别在术后第4天,6天随机取6只大鼠处死,采集心脏及血液,摘取移植心左室壁组织,行一般病理切片检查排斥情况(按Stanford分级标准,HE染色);血液标本低温3000转/分离心10分钟,取血清,分装后一20℃保存待测HA.运用SPSS12.0统计软件对实验数据进行分析。对两组移植心脏存活时间,血清HA浓度数据,以均数士标准差(x±s)表示,进行组间t检验;排斥反应等级评分比较选用Mann-Whitney u检验,以P<0.05为有显著差异的统计学指标。 结果:大鼠心脏移植急性排斥反应时的病理学改变包括:心肌组织内淋巴细胞、单核细胞浸润,心肌坏死,间质水肿等。经SIN治疗后,上述病理改变显著减轻。术后第4天,6天,血HA浓度SIN组明显低于对照组(P<0.05)。 结论:SIN能减轻大鼠移植心脏心肌组织内的淋巴细胞浸润、心肌坏死、间质水肿,SIN能明显抑制大鼠心脏移植急性排斥反应时HA增高;HA有可能作为心脏移植排斥反应指标。反应指标。

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