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岭南地区慢性HBV携带者证候特点及及补肾祛湿法对其干预的研究

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摘要

引言

第一章 慢性HBV携带者中西医研究概况

1 现代医学对慢性乙肝病毒携带者的认识

1．1 慢性乙肝病毒携带者的流行病学特征

1．2 慢性HBV感染自然病史

1．2 慢性HBV携带-“无声”的疾病

1．3 慢性HBV携带者免疫耐受主要机制

2 中医学对慢性HBV携带的认识及治疗现状

2．1 慢性HBV携带者的中医病因病机及证候规律研究

2．2 慢性HBV携带体质和证候规律的关系

2．3 岭南地区地理气候特征及与慢性HBV感染的关系

2．4 中医药对慢性HBV携带者治疗的概况

第二章 岭南地区慢性HBV携带者中医证候规律研究

1 资料与方法

1．1 资料来源

1．2 诊断标准

1．3 入选标准

1．4 排除标准

1．5 调查方法

1．6 调查方法统计学分析

2 研究结果

2．1 岭南地区慢性HBV携带者各证型和证型兼夹统计

2．2 岭南地区慢性HBV携带者中医体质分布情况

3 讨论

第三章 补肾祛湿法对慢性HBV携带者的免疫状态的影响研究

1 试验设计

2 资料与方法

2．1 治疗组与对照组入组标准

2．2 正常组(健康成人组)入组标准

2．3 治疗组与对照组排除标准

2．4 正常组(健康成人组)排除标准

2．5 试验药物组成

2．6 观察指标

2．7 主要测定方法

2．8 安全性指标

2．9 疗效判定标准

3 统计分析

4 研究结果

4．1 试验完成情况

4．2 临床疗效指标统计

4．3 两组患者治疗前后免疫功能的影响

4．4 补肾祛湿方的安全性及不良反应

5 讨论

5．1 运用补肾祛湿法治疗慢性HBV携带者的理论渊源

5．2 补肾祛湿方的组方内涵

5．3 补肾祛湿方治疗慢性HBV携带者临床疗效的观察

5．4 补肾祛湿方治疗慢性HBV携带可能的作用机理

结语

参考文献

附录

在校期间发表论文及参与课题情况

致谢

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摘要

研究目的:
　　1.通过对岭南慢性HBV携带者证候和体质规律的调查，获得其中医证候基本资料，探讨其中医证候规律及其基本病机。
　　2.评价补肾祛湿方对慢性HBV携带者的血清HBVDNA定量、血清HBsAg、HBeAg定量的影响，从而验证其临床疗效。通过观察补肾祛湿方干预对慢性HBV携带者DC成熟缺陷、数量及免疫功能指标，以及细胞因子IL-10、IL-18表达水平的影响，探求其增强机体免疫、打破免疫耐受、调节Th1/Th2平衡的机制，以期为临床治疗慢性乙肝病毒携带者提供有效的中药复方，并阐明补肾祛湿方治疗慢性HBV携带者的理论依据。
　　研究方法:
　　1.结合专家意见，制定慢性HBV携带者证候规律和体质分型调查表，选择岭南地区六家分中心886例慢性HBV携带者分别开展中医证候规律调查及体质分型调查，对其进行辨证分析及体质辩识;
　　2.采用随机、双盲、安慰剂对照的研究方法，选取2012年12月～2013年5月深圳市中医院门诊和住院的90例慢性HBV携带者，随机分为2组，治疗组60例，采用补肾祛湿方治疗;对照组30例，使用安慰剂治疗，在治疗前后分别检测血清HBV DNA定量、血清乙肝标志物HBsAg、HBeAg定量的变化及阴转情况，进行疗效评价，疗程48周。我们还选取了10名健康志愿者作为正常组，三组分别在治疗前和治疗48周后检测DC成熟缺陷（形态、表型分析）、数量及其分泌IL-12表达水平、细胞因子IL-10，IL-18表达水平。
　　研究结果:
　　1.岭南地区慢性HBV携带者证候规律和体质分型调查结果:
　　中医证型分布规律调查结果:886例岭南地区六家分中心证型调查表中，缺失2例，有效调查表884例，各证型及出现频数所占百分比分别为:肾虚出现频数235例，占26.5％，包括肾阳虚，肾阴虚，肾气虚，肾精不足;中焦湿热126例，包括湿热内阻和肝胆湿热证，占14.2％，脾虚109例，包括脾气虚，脾阳虚，占12.3％，无证可辨的145例，占16.4％，兼夹证型140例，占17.8％，以肝胆湿热为主，其中兼夹两证13例，占1.47％，兼夹三证2例，占0.23％，兼夹四证3例，占0.34％。
　　中医体质分型调查结果显示，岭南地区体质调查表中平和质所占比例最大，为58.69％，偏颇体质中气虚质、湿热质、肾虚质占的比例最大，分别占13.21％、5.87％、4.85％，三者共占除偏颇体质的70.2％。阳虚质占4.51％、气郁质占1.69％，痰湿质占1.58％，阴虚质占1.35％，瘀血质占1.58％，阴虚质占1.35％，淤血质占0.56％，特禀质占0.45％。
　　2.补肾祛湿方对慢性HBV携带者临床观察
　　①对血清HBVDNA的影响:
　　治疗前治疗组和对照组血清HBV DNA水平分别为:7.7311gIU/ml、7.6431gIU/ml，治疗48周后，两组均值分别为6.8431gIU/ml，7.3651gIU/ml，治疗组治疗前后比较有显著统计学差异(P＜0.001);而对照组治疗前后比较无统计学差异(P＞0.05)，两组治疗前后差值比较有统计学差异(P＜0.01)。治疗48周后，对照组和治疗组血清HBV DNA水平较治疗前下降＞11gIU/ml比例分别为:治疗组50％(29/58)、对照组24.14％(7/29)，两组间相比较有统计学差异(P＜0.05)。两组治疗后血清HBV DNA水平下降＞21gIU/ml比例分别为治疗组25.86％(15/58)、对照组10.34％(3/29)，两组间比较无统计学差异(P＞0.05)。治疗48周后，两组均未见HBV DNA阴转。
　　②对血清标志物的影响
　　治疗前治疗组和对照组血清HBsAg定量均值分别为4.838glgIU/ml、4.8971gIU/ml，治疗后两组血清HBsAg定量均值分别为4.1931gIU/ml、4.8631gIU/ml，治疗组治疗前后比较有显著统计学差异(P＜0.001)，而对照组治疗前后无统计学差异(P＞0.05)，两组治疗前后差值比较有显著统计学差异(P＜0.01)。治疗48周后，两组HBsAg定量较治疗前下降＞0.51gIU/ml比例分别为:治疗组41.38％(24/58)、对照组10.34％(3/29)，两组比较统计学差异显著(P＜0.01);两组治疗后HBsAg定量＞1 lgIU/ml比例分别为:治疗组25.86％(15/58)、对照组3.45％(1/29)，两组间比较有统计学差异(P＜0.05);＞2 lgIU/ml比例分别为治疗组5.17％(3/58)、对照组0.00％(0/29)，两组间比较无统计学差异(P＞0.05)，治疗48周后，治疗组和对照组皆没有到达阴转。
　　治疗组和对照组治疗前血清HBeAg定量均值分别为:治疗组1107.75S/Co、对照组1091.07S/Co，治疗48W后，两组血清HBeAg定量均值分别为:治疗组820.52 S/Co、对照组1075.46 S/Co，治疗组治疗前后比较，差异有显著的统计学意义(P＜0.001)，而对照组治疗前后差异无统计学意义(P＞0.05)，两组治疗前后差值比较有统计学意义(P＜0.05)。
　　③对树突状细胞成熟缺陷、表面标记物的影响及细胞因子的影响
　　治疗前治疗组的DC成熟表面标记物HLA-DR、CD86、CD80和CD1α的表达水平分别为61.32％、56.68％、43.81％、43.51％，对照组为60.09％、57.90％、43.10％、44.14％，两者的DC成熟表面标记物，明显低于健康人，有显著的统计学意义(均有P＜0.01)。治疗48周后治疗组的DC成熟表面标记物HLA-DR、CD86、CD80和CD1α的表达水平分别为68.24％、66.98％、53.65％、54.67％，对照组为60.16％、60.62％、46.55％、45.37％，两组相比统计学差异（均有P＜0.05）。治疗前后经配对资料方差分析，治疗组DC成熟表面标记物HLA-DR、CD86、CD80和CD1α的表达水平与正常组相比，差异有统计学意义（均有P＜0.05），而对照组与正常组相比无统计学意义（均P＞0.05）。
　　治疗前治疗组与对照组的IL-12表达水平分别为559.78ng/ml、557.63ng/ml，
　　明显低于健康人，治疗48周后，两组IL-12的表达水平分别为662.02ng/ml、565.24ng/ml，治疗前后经配对资料方差分析，两组比较有统计学差异(P＜0.05)。治疗48周后治疗组IL-12的表达水平接近健康人水平(P＞0.05)。
　　治疗前治疗组和对照组IL-10均值分别为15.86 pg/ml、15.59pg/ml，均明显高于健康人，治疗48周后，两组IL-10均值分别为12.17 pg/ml、14.65pg/ml，治疗前后经配对资料方差分析，治疗组与对照组有显著统计学意义(P＜0.001)，治疗组与正常组相比有显著的统计学差异(P＜0.001)，对照组与与正常组变化相比差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　治疗前治疗组和对照组受试者IL-18均值分别为27.97pg/ml、28.76pg/ml，两者均明显低于健康人，治疗48周后，两组IL-18均值分别为34.05pg/ml、29.61pg/ml，
　　治疗前后经配对资料方差分析，治疗组与对照组比较有显著统计学差异(P＜0.01)，治疗组与正常组相比有显著统计学差异(P＜0.01)，而对照组与正常组相比无统计学差异(P＞0.05)。
　　研究结论:
　　1.岭南地区慢性乙肝病毒携带者其最主要中医证型是肾虚型和湿热型，体质以气虚质、湿热质、肾虚质居多。“脾肾亏虚，湿毒内伏，正气不足，无力鼓邪外出”为其免疫耐受期中医基本病机。
　　2.补肾祛湿方对慢性HBV携带者的HBV-DNA复制、血清乙肝病毒标志物(HBsAg、HBeAg)的表达有一定的抑制作用，其作用的可能机制为:①通过调控DC成熟，显著上调DC成熟标志及共刺激分子，增强DC对IL-12的表达，抑制IL-10的分泌，促进IL-18表达，协同IL-12使imDC向成熟迁移，促进DC增殖，激起HBV特异性免疫应答，进而抑制/清除HBV;②通过促进Th1细胞因子IL-12、IL-18水平表达，抑制Th2型细胞因子IL-10水平的表达，促使Th2型优势表达向Th1型优势转换，调节Th1/Th2之间平衡反应，进而抑制HBV。

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