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第一章 绪论
1.1蛋白酶概况
1.1.1蛋白酶的分类
1.1.2蛋白酶的底物专一性
1.2微生物蛋白酶的研究进展
1.2.1微生物蛋白酶的来源
1.2.2真核微生物蛋白酶系
1.2.3毛霉及毛霉蛋白酶系的研究概况
1.2.4蛋白酶的应用
1.3蛋白酶在大豆蛋白酶解中的应用
1.3.1大豆蛋白研究及改性问题的提出
1.3.2大豆蛋白的酶法改性及大豆多肽
1.3.3大豆多肽研究概况
1.4本课题的立题依据和主要研究内容
1.4.1立题依据
1.4.2主要研究内容
第二章毛霉蛋白酶发酵工艺优化
2.1材料与方法
2.1.1菌种
2.1.2实验器材及试剂
2.1.3菌种斜面保藏培养基
2.1.4种子培养基及种子活化
2.1.5孢子悬浮液制备
2.1.6基础发酵培养基
2.1.7固体发酵
2.1.8酶的提取
2.1.9蛋白酶活性测定
2.1.10实验设计与统计分析
2.2结果与讨论
2.2.1固体发酵培养基的优化
2.2.2发酵条件的优化
2.3本章小结
第三章毛霉粗酶液中蛋白酶组分的分析
3.1材料与方法
3.1.1主要试剂
3.1.2主要仪器
3.1.3内肽酶活性测定——采用Folin酚体[120]
3.1.4氨肽酶活性的定性检测——平板测活性
3.1.5粗酶的提取
3.1.6粗酶中内肽酶组分特性的分析
3.1.7粗酶液中胺肽酶的组分特性
3.1.8聚丙稀酰胺凝胶电泳
3.2结果与分析
3.2.1毛霉粗酶液中内肽酶组分特性
3.2.2毛霉粗酶液中内肽酶组分的稳定性
3.2.3毛霉粗酶液中氨肽酶的组分特性
3.3本章小节
第四章毛霉胞外内肽酶的纯化及性质研究
4.1材料与方法
4.1.1主要试剂
4.1.2主要仪器
4.1.3蛋白质浓度测定
4.1.4内肽酶活性测定——采用Folin酚法
4.1.5粗酶的提取
4.1.6毛霉碱性内肽酶的纯化方法
4.1.7毛霉酸性内肽酶的纯化方法
4.1.8聚丙稀酰胺凝胶电泳
4.1.9酶谱检测
4.1.10毛霉内肽酶催化性质的测定
4.1.11毛霉内肽酶动力学特性测定
4.2结果与分析
4.2.1毛霉内肽酶的分段盐析
4.2.2毛霉碱性内肽酶的纯化
4.2.3毛霉酸性内肽酶的纯化
4.2.4毛霉胞外内肽酶的鉴定
4.2.5毛霉碱性内肽酶的催化性质
4.2.6毛霉酸性内肽酶的性质
4.3本章小结
第五章毛霉内肽酶对大豆蛋白的水解
5.1材料与方法
5.1.1实验材料
5.1.2大豆蛋白水解度的测定——甲醛滴定法
5.1.3毛霉碱性内肽酶对大豆蛋白的水解
5.1.4毛霉酸性内肽酶对大豆蛋白的水解
5.1.5不同蛋白酶对大豆蛋白的水解
5.1.6大豆蛋白的复合酶解
5.2结果与讨论
5.2.1毛霉碱性内肽酶对大豆蛋白的水解
5.2.2毛霉酸性内肽酶对大豆蛋白的水解
5.2.3不同蛋白酶对大豆蛋白的水解
5.2.4大豆蛋白的复合酶解
5.3本章小结
第六章毛霉胞外氨肽酶组分的纯化及性质分析
6.1材料与方法
6.1.1主要试剂
6.1.2主要仪器
6.1.3氨肽酶活性测定方法
6.1.4氨肽酶的初步纯化
6.1.5氨肽酶的催化特性
6.2结果与分析
6.2.1毛霉氨肽酶的初步纯化(组分离)
6.2.2毛霉氨肽酶的催化特性
6.3本章小节
结论与展望
参考文献
附录
攻读博士学位期间取得的研究成果
致谢
