以VEGF为靶标的小分子RNA抑制效果的评估

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第一章绪论

1.1引言

1.2研究背景

1.2.1 VEGF的特性

1.2.2血管生成因子(VEGF)与肿瘤的关系

1.2.3 RNAi的研究进展

1.3本课题主要研究内容

第二章质粒的大量提取与纯化

2.1实验材料

2.1.1质粒与工程菌

2.1.2主要药品与试剂

2.1.3主要仪器

2.1.4溶液的配制

2.2实验方法与步骤

2.2.1感受态细胞的制备

2.2.2质粒的转化

2.2.3质粒的大量提取

2.2.4质粒的纯化

2.3实验结果

2.3.1质粒纯化电泳图

2.4本章小结

第三章Western Blot检测siRNA抑制血管生成因子(VEGF)蛋白表达的效果

3.1实验材料

3.1.1细胞系

3.1.2药品与试剂

3.1.3主要仪器设备

3.1.4溶液的配制

3.2实验方法

3.2.1细胞培养

3.2.2 Western Blot

3.3 Western Blot实验结果与分析

3.3.1转染条件优化的结果

3.3.2 Western Blot实验结果与分析。

3.4本章小结

第四章实时荧光定量PCR技术检测siRNA抑制VEGF mRNA表达的效果

4.1实验材料

4.1.1细胞系

4.1.2主要药品与试剂

4.1.3主要仪器设备

4.1.4溶液的配置

4.2实验步骤

4.2.1特异性引物的设计

4.2.2实验器具的处理与准备

4.2.3 RNA提取

4.2.4实时荧光定量PCR

4.2.5实验结果与分析

4.3本章小结

第五章鸡胚动物模型检测VEGFsiRNA抑制血管生成效果

5.1鸡胚的结构与特点

5.2仪器与试剂

5.3实验方法

5.3.1实验方案

5.3.3转染siRNA表达质粒实验步骤

5.4实验结果与分析

5.4.1正常鸡胚不同日龄的血管分布

5.4.2正常胚胎和死胚对比

5.4.2 siRNA组实验结果

5.5本章小结

总结与展望

参考文献

在攻读学期间发表的学术论文

致谢