• 主题
高级搜索  >
历史搜索 清空历史
首页> 中文学位 >HIV-1感染者抗p24和gp41体液免疫应答的特征及流行病学意义
【6h】

HIV-1感染者抗p24和gp41体液免疫应答的特征及流行病学意义

代理获取
页面导航
  • 目录
  • 摘要
  • 著录项
  • 相似文献
  • 相关主题

目录

摘要

前言

第一章 HIV-1 p24蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化和活性鉴定

1．1 本章内容

1．2 实验材料与仪器

1．3 实验方法

1．4 实验结果

1．5 本章小结

第二章 HIV-1感染者针对重组p24、gp41蛋白及其肽段的体液免疫应答特点

2．1 本章内容

2．2 实验材料与仪器

2．3 实验方法

2．4 实验结果

2．5 本章小结

第三章 一种区分不同HIV-1感染时期的实验室检测方法的初步建立

3．1 本章内容

3．2 仪器与试剂

3．3 实验方法

3．4 实验结果

3．5 本章小结

讨论

参考文献

缩略表(Abbreviations)

攻读硕士学位期间成果

致谢

声明

展开▼

摘要

研究背景:
　　人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus，HIV)是导致获得性免疫缺陷综合征(Acquired Immunodeficiency Syndrome，AIDS)的病原体。HIV-1的跨膜糖蛋白gp41在HIV-1众多蛋白中最为保守，能诱导产生多个中和抗体，是免疫检测试剂盒中最为常见的检测抗原及疫苗研发的目标。衣壳蛋白p24在病毒蛋白中含量最为丰富，其氨基酸序列在多种亚型中高度保守，也是感染后最早能检测到的抗原，使其也成为重要的生物标志物。
　　研究发现在HIV-1感染者体内存在体液免疫应答模式的转变，提示p24和gp41的免疫优势表位或能成为区分不同感染模式的生物标志物，对建立实验室检测方法有利用价值。
　　研究目的:
　　本课题通过重组表达的p24、gp41蛋白，合成p24、gp41的系列肽段作为包被抗原，探究与HIV-1感染人群外周血与病毒蛋白或肽段的免疫反应特征，探讨HIV-1感染者的体液免疫应答模式及其特点，分析HIV-1感染者体液免疫应答模式与感染者病程进展指标的关联，发现有使用价值的特殊生物标志物，建立能区分不同感染时期的实验室检测方法。
　　研究方法:
　　构建p24的重组表达质粒，转化至大肠杆菌感受态细菌。经过诱导表达可溶性重组蛋白并对重组蛋白进行纯化。表达产物用SDS-PAGE电泳和间接ELISA分析鉴定其活性。
　　收集不同人群来源的HIV-1阳性血浆样本，利用商品化试剂盒将样本区分为近期感染和长期感染，观察不同人群在感染时期分布上的差异。分别合成3条覆盖p24和gp41不同区域的肽段。分析不同人群，不同感染时期的样本与重组蛋白及肽段的免疫反应特点。
　　分析不同感染时期的样本与肽段的免疫应答情况，筛选出具有区分HIV-1不同感染时期能力的肽段。优化反应条件，初步建立区分HIV-1不同感染时期的实验室检测方法。通过与两种商品化试剂盒鉴定结果的比较，评价方法的敏感性和特异性。
　　研究结果:
　　成功构建p24的原核表达质粒并诱导表达，蛋白电泳与预期相符，间接ELISA分析显示p24具有抗原特异性。
　　88.3％(233/264)的样本不与三个覆盖p24主要免疫优势表位的三个肽段反应，与此形成对比的是，87.7％(236/269)的样本至少与一个gp41的肽段反应。随着感染时间的延长，HIV-1感染者体内gp41-p1特异性抗体滴度逐步上升，感染时间与gp41-p1的酶免实验OD值之间的相关系数为0.78。
　　将gp41和gp41-p1作为捕捉抗原，gp41抗体阳性和gp41-p1抗体阴性定义为近期感染，gp41抗体阳性和gp41-p1抗体阳性定义为长期感染，初步建立了一种能区分HIV-1新近和长期感染的实验室检测方法。
　　研究结论:
　　HIV-1感染者针对p24和gp41的体液免疫应答模式存在较大差异，此为依据，初步建立了一种区分HIV-1新近感染和长期感染的实验室检测方法。

著录项

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
代理获取

客服邮箱：kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备：11010802029741号 ICP备案号：京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有

  • 客服微信

  • 服务号