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人脐带间充质干细胞在PHBVHHx生物材料支架上分化为肝细胞的研究

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第1章 前言

1.1 干细胞 (Stem Cell,SC)概述

1.2 间充质干细胞 (Mesenchymal Stem Cell,MSC)概述

1.3间充质干细胞向肝细胞分化的研究进展

1.4肝组织工程概述

1.5聚羟基脂肪酸酯(PHA)概述

1.6 选题的目的及意义

第2章 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

第3章 结果及讨论

3.1 BM-MSCs和UC-MSCs的分离培养与鉴定

3.2 BM-MSCs和UC-MSCs的肝细胞方向分化的鉴定

3.3讨论与小结

第四章 结语

参考文献

致谢

个人简历和在学期间发表论文情况

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摘要

肝脏作为机体最重要的生命器官之一,在机体的代谢、排毒、循环调节等方面发挥着重要的功能,同时肝脏疾病也是影响人体健康的重要疾病之一,目前,对于一些严重的末期肝脏疾病,诸如肝癌,急性肝衰竭等,最为有效的治疗手段就是原位肝移植,然而由于供体肝缺乏,高昂的费用,以及异种免疫排斥等原因,使其临床应用受到很大的限制。因此,一种新的以细胞为基础的肝病治疗法,例如肝组织工程,旨在造出一个人造肝组织使其成为患者肝组织的替代品。肝脏组织工程为肝病的治疗带来了新的希望。
  近年来间充质干细胞的研究和应用备受关注,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有很强增殖能力和多分化潜能,具有跨胚层分化能力,而且间充质干细胞容易获得,易于分离培养和扩增。因此间充质干细胞(MSCs)作为组织工程的种子细胞具有良好的应用前景。在本论文中间充质干细胞分离自人脐带沃顿胶质组织(Wharton’s jelly)经过体外诱导培养分化为肝样细胞,并将其与骨髓来源的间充质干细胞(BM-MSCs)进行比较。研究表明脐带间充质干细胞和骨髓间充质干细胞都具有相似的间充质干细胞特性,都能在体外诱导分化为成骨细胞,脂肪细胞和软骨细胞。经过肝细胞诱导分化液的诱导培养后,分化后的细胞都能够表达肝细胞特异性的蛋白和基因(albumin,AFP,CK-18)并且具有糖原合成能力和低密度脂蛋白吸收能力,结果表明脐带间充质干细胞和骨髓间充质干细胞具有相似的肝细胞分化潜能。但是与骨髓间充质干细胞相比,脐带间充质干细胞更容易获得,具有低的免疫原性,所以脐带间充质干细胞作为组织工程的种子细胞更具优势。
  聚羟基脂肪酸酯(PHA)是微生物在营养不平衡的环境下产生的一类高分子生物线性聚酯,研究表明PHA有良好的生物相容性及生物可降解性,三聚物PHBVHHx与其他的PHA材料相比具有更好的生物相容性,更利于细胞的贴附生长,所以PHBVHHx在肝组织工程的研究上具有很好的应用前景。
  本研究中我们选择脐带间充质干细胞作为肝组织工程的种子细胞,三聚物PHBVHHx作为支架材料,研究生物材料PHBVHHx支架对脐带间充质干细胞体外分化为肝细胞的影响。本实验研究结果表明PHBVHHx支架能够支持脐带间充质干细胞的生长,并且脐带间充质干细胞在PHBVHHx支架上在肝细胞诱导液的诱导培养下能够分化肝样细胞。总之本研究可以为肝组织工程的研究提供一定的实验信息和数据。

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