首页> 中文学位 >Effects of Ginsenoside on Apoptosis of Neurons and Expressions of Bcl-2 and Caspase-3 in Rats with Spinal Cord Injury

【6h】

Effects of Ginsenoside on Apoptosis of Neurons and Expressions of Bcl-2 and Caspase-3 in Rats with Spinal Cord Injury

代理获取

页面导航

目录
摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

背景:
　　脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后导致损伤平面以下的感觉和运动功能丧失,是临床治疗的一大难题。目前研究认为有两种机制:即原发性损伤,包括机械压迫、出血、电解质从受损细胞中外溢;继发性损伤,包括水肿、炎性反应、局部缺血、生长因子、细胞因子、再灌注、钙超载、细胞凋亡、微循环障碍、脂质过氧化及过氧化基团异常变化等对脊髓产生的毒害作用。而继发性改变使脊髓损伤从可逆性损伤发展成为不可逆性损伤,导致神经细胞凋亡,最终长期丧失神经功能。
　　研究表明脊髓损伤后继发的细胞凋亡是神经细胞死亡的主要方式。细胞凋亡由相关基因调控,如Bcl-2家族、P53基因及Caspase家族等等;其中Bcl-2家族是调节细胞程序性死亡的重要基因,又包括两大类:促生存家族和促凋亡家族,而在促生存家族里Bcl-2研究的较早、较多,它对细胞的凋亡和坏死均有抑制作用。Bcl-2是通过多种途径对细胞调控,它可调节细胞的氧化还原状态,通过抗氧化途径,抑制神经元死亡过程中活性氧的产生。Bcl-2的表达还有利于抑制谷氨酸神经毒性、减轻神经细胞内钙超载和自由基堆积等。
　　Caspase家族是近年来发现的另外一族与细胞凋亡相关的基因家族,存在于细胞质中,具有半胱氨酸蛋白酶和天冬氨酸特异酶切位点,故现称为半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Cysteinyl aspartate specific proteases,Caspase),也是调节细胞凋亡的基因,该家族大多数促进细胞凋亡。在哺乳动物细胞内有11种(caspases-1~10,13),其中Caspases-3在凋亡过程中起着决定性的作用,被称为死亡蛋白酶,激活的Caspases-3可通过几种不同途径诱导细胞凋亡的发生,在细胞凋亡早期的启动与执行过程中起着重要作用。在脊髓损伤中也发挥同样作用。故研究神经细胞凋亡可以观察相关基因Bcl-2和Caspases-3的表达。
　　人参皂甙是人参和西洋参主要的活性成分,对人体内分泌系统、免疫系统、心血管系统、神经系统、物质代谢等生命过程均有作用。国内外学者对人参皂甙促进周围神经再生的作用研究较多,但它对中枢神经系统是否有保护作用,研究较少,尤其在治疗SCI方面。
　　目的:
　　观察大鼠脊髓损伤后脊髓神经功能变化和病理改变,探讨应用人参皂甙后对脊髓损伤段神经细胞凋亡及其相关基因Bcl-2和Caspases-3表达的影响,以及对脊髓神经功能的保护作用。
　　材料和方法:取Wistar大鼠30只,随机平均分为三组:假手术组、损伤组和治疗组。脊髓损伤动物模型建立采用改良Allen’s撞击法。戊巴比妥钠按30mg/kg体重腹腔注射麻醉,常规消毒铺巾后,行T9-10椎板切除术,暴露硬脊膜,用重10 g金属棒从2.5 cm高处沿中空钢管垂直自由落下撞击T9-10脊髓,造成急性中度SCI。假手术组只做T9-10椎板切除术,显露硬脊膜,不用重物撞击。术后治疗组给予人参皂甙100mg/kg.d,腹腔注射;而假手术组和损伤组给予等量生理盐水。术后第一天应用联合行为评分(combined behavioral score,CBS)评价大鼠脊髓神经功能,第28d再次给予CBS评分。然后麻醉下剖胸,经左心室-主动脉插管,剪开右心耳,灌注生理盐水约200ml,直至流出液澄清。用40g/L多聚甲醛约200ml灌注固定30 min,解剖椎管取出损伤段脊髓及损伤上下段各约0.5cm,再置于40g/L多聚甲醛内过夜进行后固定,然后常规进行脱水、石蜡包埋。做冠状面连续切片,切片厚约5μm,H.E染色观察形态学变化;进行细胞凋亡的检测(TUNEL)、免疫组化法检测Bcl-2蛋白的表达以及Caspase-3的表达,采用计算机图像分析技术进行分析。
　　结果:假手术组脊髓神经功能正常,损伤组和治疗组均有明显神经功能障碍,而治疗组经人参皂甙治疗后神经功能较损伤组有明显改善;病理变化:假手术组无损伤性改变,损伤组和治疗组均有不同程度变化,损伤组病理变化较治疗组重,与损伤组相比差异有显著性;免疫组化观察到各组中均有凋亡细胞、Bcl-2蛋白及Caspase-3蛋白阳性表达;假手术组仅有散在凋亡细胞、Bcl-2蛋白及Caspase-3蛋白,损伤组和治疗组各指标均明显增加,其中损伤组细胞凋亡指数(apoptosis indices, AI)大于治疗组,而Bcl-2蛋白阳性细胞计数小于治疗组,Caspase-3表达的神经细胞则明显多于治疗组,各指标检测结果在统计学上差异有显著性。
　　结论:脊髓损伤后出现不同程度的神经功能障碍及病理改变,应用人参皂甙治疗能够抑制继发性神经细胞凋亡,增加神经细胞中Bcl-2蛋白阳性表达和降低Caspase-3的活性,从而保护脊髓神经功能并促进其恢复。

著录项

作者
尚建伟;
展开▼
作者单位

汕头大学;

展开▼
授予单位汕头大学;
学科
授予学位硕士
导师姓名孔抗美,齐伟力;
年度 2006
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类脊髓;化学分析与鉴定;
关键词
急性脊髓损伤; 人参皂甙; Bcl-2基因; Caspases-3基因; 细胞凋亡; 神经功能; 动物模型;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

Effects of Ginsenoside on Apoptosis of Neurons and Expressions of Bcl-2 and Caspase-3 in Rats with Spinal Cord Injury

目录

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅