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基于人脐血来源的干细胞研发人-鼠嵌合体动物模型及其利用该模型探讨人干细胞体内生物学行为

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文摘

英文文摘

论文说明:缩略表

引 言

第一节干细胞生物学

第二节干细胞与再生医学

第三节活体人干细胞研究模型与人干细胞体内生物学行为探讨

第四节本论文研究的目的和意义

第一部分人脐带血来源的单个核细胞宫内移植建立人/大鼠异种移植嵌合体动物模型及其应用

第一章人脐带血来源的单个核细胞宫内移植建立人/大鼠异种移植嵌合体动物模型

1.材料与方法

2.结果与分析

3.小结

附表和附图

第二章人/大鼠嵌合肝上不同分子表型人肝细胞样细胞的鉴定

1.材料与方法

2.结果与分析

3.小结

附表和附图

第三章人肝细胞样细胞在人/大鼠异种移植嵌合体动物肝脏再生过程中细胞表型的演变

1.材料与方法

2.结果与分析

3.小结

附表和附图

第四章人/大鼠嵌合免疫器官上不同分子表型人淋巴细胞样细胞的鉴定

1.材料与方法

2.结果与分析

3.小结

附表和附图

第五章讨论

第二部分人脐带血CD133+细胞囊胚腔注射建立人/小鼠异种移植嵌合体动物模型及其应用

1.材料与方法

2.结果与分析

3.小结

4.讨论

附表和附图

参考文献

抗体种间交叉反应表

附录 读博期间所获主要荣誉及奖励:

读博士期间已发表论文目录:

致 谢

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摘要

目前人类对干细胞命运决定的调控机制已有一定认识,但是这些有关干细胞行为决定及其调控机制的知识大多数来源于离体和在体的鼠类模型,而这些信息有时很难真实反映人体上的情况;即使其中许多能较为真实地反映人体上的情形,但在指导临床实践前也必须在活体人干细胞研究模型上加以验证。此外,有关人的生物医学研究绝大多数使用离体的细胞模型,而体外研究模型缺乏生命有机体的许多组成部分和复杂性;事实上,只有活体动物模型才能准确复制生物网络的复杂性。来自干细胞所居住微环境中支持细胞的一系列调控信号与干细胞自身内在机制相互作用而最终决定了干细胞行为。因此,模拟各类成体干细胞体内微环境作为体外干细胞增殖与分化条件是大家共同奋斗的目标。 既然来源于鼠类和离体的人细胞模型的信息不能总是准确反映人体上的真实情况,因此为了有助于更好理解人干细胞在活体内的生物学行为以及阐明人干细胞行为决定的调控机制和指导临床实践,研发拥有正常生理环境和拥有正常的免疫系统(包括重建的人免疫系统)的活体人干细胞研究的小型动物(如大鼠和小鼠)模型是极其必要的,该活体模型允许人供体细胞(如人的干细胞/前体细胞)及其在受体内衍生的细胞在异种受体环境内参与各类组织特异的人细胞的生成,并进而在正常生理条件下参与人-鼠嵌合组织形成和人-鼠嵌合器官发生,出生后继续参与人-鼠嵌合组织稳态维持等。该模型将加速对人体发育、人成体干细胞命运决定、人体组织形成与器官发生、人体组织稳态维持以及人体组织或器官再生与修复等相关调控机制的认识。 有鉴于此,我们拟利用人脐带血(Human umbilical cord blood,hUCB)来源的单个核细胞(Monommlear cells;MNCs)通过宫内移植(In utero transplantation)建立人/大鼠异种移植嵌合体动物模型和通过hUCB CDl33<'+>细胞囊胚腔注射建立人/小鼠异种移植嵌合体动物模型。

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