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【6h】

AdEasy XL腺病毒载体转导CEA启动子启动双自杀基因CD/TK对CEALovo结肠癌细胞的杀伤作用

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前 言

材料与方法

1主要试剂

2主要仪器

3引物设计与合成

4PCR扩增目的基因

5插入质粒PSDTRACK(PAT)构建PATCP

6CD基因插入质粒PATCP构建PATCPC

7HSV-YK基因插入质粒PATCPC构建PATCPCT

8建立重组AdEasy质粒DNA

9XL10-Gold细胞扩增重组AdEasy质粒DNA

10AD-293细胞培养

11利用重组AdEasy质粒DNA制备原代病毒备份

12Lovo及Hela细胞培养同AD-293细胞培养

13各组病毒转染LOVO及Hela细胞

14体外抑瘤实验

15统计方法

结 果

结 果一

结 果二

讨论

总结

参考文献

附 件

致 谢

原创性声明

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摘要

目的:构建含有Cp启动的双自杀基因CD与TK的复制缺陷型腺病毒,探讨组织特异性双自杀基因对Lovo结肠癌细胞杀伤作用,近而为所有CEA<'+>肿瘤的基因治疗开辟新的途径.结论:RA-Cp.C.T构建正确,具有CD与TK的双重生物学功能;AdEasy XL细胞毒载体系统转导Cp.C.T具有高效性,易于观察转染效果;RA-Cp.C.T靶向性高效杀伤CEA<'+>的Lovo结肠癌细胞,而对CEA<'->的Hela子宫颈癌细胞生长无影响;双自杀基因细胞毒效应以及

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