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浓缩果汁中苯并咪唑杀菌剂及其中间转化产物的液相色谱—串联质谱分析方法的研究

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摘要

第一章 前言

1.1 苯并咪唑杀菌剂的研究进展

1.1.1 苯并咪唑杀菌剂的发展历史

1.1.2 苯并咪唑杀菌剂的特性

1.1.3 苯并咪唑杀菌剂的主要类型

1.1.4 苯并眯唑杀菌剂的发展前景

1.2 关于浓缩果汁的研究

1.2.1 浓缩果汁的生产状况及其发展

1.2.2 浓缩果汁中的质量监测指标

1.2.3 浓缩果汁中苯并咪唑类杀菌剂残留的检测方法的讨论

1.3 液相色谱-串联质谱技术

1.3.1 高效液相色谱技术

1.3.2 质谱技术

1.3.3 液相色谱-串联质谱技术

1.4 研究的目的和意义

1.5 研究内容

1.6 技术路线

第二章 浓缩果汁中苯并咪唑杀菌剂残留量液相色谱-串联质谱分析方法研究

2.1 引言

2.2 实验材料

2.2.1 仪器设备

2.2.2 试剂

2.2.3 标准品

2.2.4 空白样品

2.3 实验方法

2.3.1 试样保存

2.3.2 标准溶液配制

2.3.3 质谱、色谱条件的选择

2.3.4 样品前处理条件的确定

2.3.5 检测浓缩果汁中4种常见苯并咪唑类杀菌剂的液相色谱-串联质谱方法的评价分析研究

2.4 结果与分析

2.4.1 色谱及质谱条件的确定

2.4.2 样品前处理条件的确定

2.4.3 检测浓缩果汁中4种常见苯并咪唑类杀菌剂的液相色谱-串联质谱方法的分析评价结果

2.5 讨论与小结

2.5.1 讨论

2.5.2 小结

第三章 4种苯并咪唑杀菌剂标准溶液稳定性研究

3.1 引言

3.2 实验材料

3.2.1 仪器设备

3.2.2 试剂

3.2.3 标准品

3.3 实验方法

3.3.1 标准溶液配制

3.3.2 测定步骤

3.4 结果与分析

3.4.1 4℃下2-氨基苯并咪唑标准溶液的稳定性监测结果

3.4.2 4℃下多菌灵的稳定性监测结果

3.4.3 4℃下噻菌灵的稳定性监测结果

3.4.4 4℃下甲基硫菌灵的稳定性监测结果

3.4.5 4℃下混合储存对各杀菌剂稳定性的影响

3.4.6 -18℃冷冻条件下各杀菌剂的稳定性测定

3.5 小结

3.6 讨论

第四章 5-羟基噻菌灵含量检测的液相色谱—串联质谱法的研究

4.1 引言

4.2 实验材料

4.2.1 仪器设备

4.2.2 试剂、样品、标准品

4.3 实验方法

4.3.1 试样保存

4.3.2 标准溶液配制

4.3.3 测定方法的研究

4.3.4 方法的测定条件

4.3.5 基质效应的影响研究

4.3.6 方法的评价分析

4.4 结果与分析

4.4.1 色谱、质谱条件的确定

4.4.2 样品前处理条件的确定

4.4.3 方法的评价

4.5 结论

第五章 实验室间验证分析

5.1 引言

5.2 实验材料

5.2.1 仪器设备

5.2.2 试剂、样品、标准品

5.3 实验方法

5.3.1 试样保存

5.3.2 标淮溶液配制

5.3.3 仪器条件及测定步骤

5.4 结果与分析

5.5 本章小结

第六章 结论与展望

6.1 结论

6.2 创新性

6.3 展望

参考文献

附录

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

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摘要

苯并咪唑类杀菌剂作为一类农药被广泛应用于果、蔬等农业领域,研究表明苯并咪唑类杀菌剂存在危害食品安全等严重问题。目前,我国对浓缩果汁中苯并咪唑杀菌剂的研究较少,同时存在其残留检测技术落后,无国家残留检测标准等问题。因此,开展浓缩果汁中苯并咪唑杀菌剂及其中间转化产物的残留检测技术研究,对加快建立浓缩果汁中苯并咪唑类杀菌剂残留检测的国家标准,保证我国食品卫生安全及浓缩果汁进出口质量安全,打破国际贸易技术壁垒等方面均具有重要的理论和现实意义。
   本论文研究了浓缩果汁中常见苯并咪唑杀菌剂残留检测的液相色谱-串联质谱分析方法,并探讨了浓缩果汁中常见苯并咪唑杀菌剂的标准溶液稳定性及各杀菌剂间的相互作用。在此基础上,建立了可同时检测浓缩果汁中常见苯并咪唑杀菌剂及其中间转化产物的液相色谱-串联质谱分析方法。主要研究结果如下:
   1、建立浓缩果汁中常见苯并咪唑杀菌剂及其中间转化产物残留量检测的液相色谱-串联质谱分析方法,前处理条件:称样2g,采用20mL乙腈作为提取溶剂,提取样液的pH调至8.5-8.6,样液的提取次数为2次,总提取时间为30min,确定PSA柱为净化柱,浓缩量控制在1.5mL-2mL;色谱条件:色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(Agilent,美国):4.6mm×50mm(内径),粒径为1.8μm,流动相为缓冲盐溶液(0.1%甲酸-10mmol/L乙酸铵,A)和甲醇(B)梯度洗脱,流速为0.4mL/min,进样体积为10μL,色谱柱温度为40℃。当4种杀菌剂及5-羟基噻菌灵的混合标准溶液的添加水平在1、2、10μg/kg(2-氨基苯并咪唑和5-羟基噻菌灵的浓度为2、4、20μg/kg)时,得到方法的回收率在70.7%~107.5%之间,变异系数在0.1%~11.8%之间,检出限为:2-氨基苯并咪唑2μg/kg、5-羟基噻菌灵2μg/kg、多菌灵1μg/kg、噻菌灵1μg/kg、甲基硫菌灵1μg/kg。该方法分离效果好,线性关系性好,可检测出并全面反映浓缩果汁中主要苯并咪唑类杀菌剂及其中间转化产物的残留水平,对控制浓缩果汁的质量安全具有重要意义
   2、对浓缩果汁中4种常见苯并咪唑杀菌剂标准溶液进行了为期一年的稳定性监测研究。得出4种苯并咪唑杀菌剂标准溶液的稳定性分析结果如下所示:在4℃条件下,4种杀菌剂的降解量为40.63%-86.81%;混合储存时,2-氨基苯并咪唑的稳定性比单独储存时差,多菌灵、甲基硫菌灵的稳定性则比单独储存时要好,而对于噻菌则无明显影响;-18℃条件下,各杀菌剂的稳定性很好稳定,几乎无降解情况出现。该实验结果表明在正常的冷藏条件下,4种苯并咪唑杀菌剂在一年时间里均存在相当大程度的转化与降解。这为如何全面地研究浓缩果汁中4常见苯并咪唑类杀菌剂的残留检测技术提供理论依据,为分析这4种杀菌剂在浓缩果汁中的转化及降解规律提供参考依据,同时也为如何搭配使用这4种杀菌剂提供了参考。
   3、进行了同时检测浓缩果汁中4种常见苯并咪唑杀菌剂及其中间转化产物残留的液相色谱-串联质谱分析方法的实验室间验证工作。开展了在陕西、上海、山西、福建、柳州、东兴出入境检验检疫局6家检验检疫单位对苹果、梨、芒果、西番莲、橙、荔枝、菠萝浓缩果汁样品的空白加标实验。实验对空白样品添加2-氨基苯并咪唑、5-羟基噻菌灵、多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵这5种杀菌剂的混合标准溶液,其添加的浓度水平分别为1、2、10μg/kg(内含2-氨基苯并咪唑、5-羟基噻菌灵的浓度为2、4、20μg/kg),各实验室检测结果显示该方法的实验室间回收率范围为83.5~102.7%,变异系数为1.2~6.3%。验证结果表明新建方法切实可行。

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